转Bacillus thuringiensis (Bt)基因抗虫作物的应用能有效防控靶标害虫的发生,降低广谱杀虫剂的施用,保护农田生态环境。但是,转基因作物的种植是否会非靶标生物如在农田发挥害虫种群控制作物用的天敌昆虫带来负面影响一直是转基因生态安全领域关注的一个焦点问题。龟纹瓢虫Propylea japonica Thunberg和日本通草蛉Chrysoperla sinica Tjedar是农田生态系统中常见的捕食性天敌昆虫。两类天敌昆虫除了捕食猎物,还有取食花粉的习性,特别是草蛉成虫不捕食昆虫,主要以花粉为食物。这样,两种天敌昆虫均可通过取食Bt作物花粉而直接摄取到Bt蛋白。因此,两种天敌昆虫被作为指示性生物而广泛应用于转基因抗虫作物非靶标效应评价工作中。本研究评价了转crylAb/2Aj和转crylAc基因玉米对龟纹瓢虫幼虫和日本通草蛉成虫的生态安全性。研究结果归纳如下：1、基于本实验室的前期工作及经验,发展了评价转基因抗虫玉米花粉对龟纹瓢虫幼虫潜在影响的生测体系。通过所发展的生测体系,将非转基因玉米(郑58)花粉直接饲喂给龟纹瓢虫幼虫,通过昆虫解剖镜检发现：龟纹瓢虫幼虫取食到大量的玉米花粉,且花粉取食量随着幼虫龄期的增长而显著增加,四龄幼虫的花粉取食量达到最高为138.94±22.89μg。结果说明所发展的饲喂体系允许瓢虫幼虫取食到大量的玉米花粉。以相应的非转基因亲本花粉为对照,采用该生测体系评价了两种转基因抗虫玉米品种双抗12-5(转crylAb/2Aj基因)和BT-799(转cry1Ac基因)对龟纹瓢虫幼虫的潜在影响。结果显示：取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫幼虫发育历期缩短,但对龟纹瓢虫幼虫其他生命参数如存活率、化蛹率、羽化率和成虫鲜重没有显著影响。为了明确Bt玉米花粉被龟纹瓢虫幼虫取食后其所含Cry蛋白的归趋,检测转crylAb/2Aj基因玉米新鲜花粉粒及龟纹瓢虫幼虫粪便中花粉粒中Cry蛋白的平均含量,分析显示大约77%的CrylAb/2Aj蛋白被瓢虫幼虫排出体内。结果说明,龟纹瓢虫通过取食转Bt基因玉米花粉可暴露于花粉中包含的Cry蛋白,但CrylAb/2Aj和CrylAc蛋白对龟纹瓢虫幼虫没有毒性,种植表达这类Bt蛋白的转基因玉米对龟纹瓢虫不会产生显著的负面影响。2、发展了评价转基因玉米花粉对日本通草蛉成虫潜在影响的试验体系,评价取食转crylAb/2Aj和crylAc基因的玉米花粉对日本通草蛉成虫的安全性。结果表明：取食转基因玉米花粉25天,日本通草蛉成虫的存活率、产卵前期和日均产卵量等生命表参数与取食非转基因亲本对照玉米花粉的草蛉成虫没有显著性差异。通过ELISA试验进一步明确了试验中日本通草蛉成虫取食到较高浓度的Cry蛋白。结果表明,Cry1Ab/2Aj和CrylAc蛋白对日本通草蛉没有毒性,种植转crylAb/2Aj和crylAc基因玉米对日本通草蛉成虫不会带来显著的负面影响。