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2009年3月新甲型H1N1流感病毒在墨西哥暴发,同年4月第1株2009甲型H1N1流感病毒被分离,之后有越来越多的报道表明2009甲型H1N1流感病毒可以由人向猪传播。研究证明,2009甲型H1N1流感病毒是混合了猪源流感病毒、禽源流感病毒和人源流感病毒三者特征的重组病毒,给养猪业带来巨大经济损失,也对人类的健康构成威胁。因此对猪群中H1N1流感病毒进行流行病学调查和监测具有重要的公共卫生意义。本实验从2013年1月~2014年12月对广西省部分养猪场及发病猪群进行样品采集和病毒的分离,目的为研究该区域猪群中流行的流感病毒亚型、变异规律和发病情况,为猪流感的研究和防控提供参考。实验成果如下:1.从发病猪群分离鉴定得到12株H1N1亚型猪流感病毒,其中1株为2009甲型H1N1流感病毒。本研究从2013年1月~2014年12月采集至广西8个市(地区)发病猪群的猪组织病料共1609份进行病毒分离。经9-11日龄SPF鸡胚分离得到12株猪流感病毒株。运用RT-PCR的方法对12株病毒的HA和NA基因进行扩增和序列测定分析,鉴定12株病毒均为H1N1亚型,其中1株为2009甲型H1N1流感病毒。将这株猪源2009甲型H1N1流感病毒株作为本实验研究的对象,并命名为A/swine/Guangxi/18/2013(H1N1)。2.遗传进化分析表明分离株8个基因片段与其他2009甲型H1N1流感病毒的进化关系一致。对A/swine/Guangxi/18/2013(H1N1)全基因组的8个基因片段进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定,运用MegAlign软件进行核苷酸和氨基酸的比较分析,再通过MEGA5.0软件构建遗传进化树。进化分析结果表明分离株与2009甲型H1N1流感毒株处于同一个进化枝,与A/California/04/2009(H1N1)亲缘关系很近,起源于同一祖先。其基因来源情况为:HA、NS和NP基因来源于古典型H1N1猪源谱系,NA和M基因来源于类禽型H1N1猪源谱系,PA和PB2基因来源于禽源谱系,PB1基因来源于H3N2人源谱系。分离株8个基因片段在抗原位点、受体结合位点、糖基化位点以及耐药性位点等多处氨基酸发生了变异,表明其抗原特性、宿主适应性、致病力以及抗药性发生了变化。3.动物实验发现分离株对BALB/c小鼠具有致病性。对BALB/c小鼠的攻毒实验结果显示病毒可感染小鼠,并能在肺脏与鼻甲骨组织中进行有效复制,感染小鼠后引起明显的临床症状,体重迅速下降造成小鼠平均体重最高降幅为13.02%。