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红细胞是血液中主要成分之一,具有运输氧气和二氧化碳的作用。一次性大量失血、严重贫血或严重感染的手术前等情况需要输注红细胞,因而临床上对血液的需求大。血液离体后的保存效果或时间,对临床用血及安全具有重要的作用。红细胞的冰冻保存是一种离体后有效的保存办法。目前以高浓度甘油作为冰冻红细胞的主要保护剂。高浓度甘油溶液具有很高的渗透压且对细胞无维持稳定的作用,用此甘油化细胞时,需要调节细胞的渗透压及维持细胞正常形态。研究发现,嗜盐菌和耐盐菌内的四氢嘧啶(ectoine),可调节细菌的渗透压。本研究根据目前的研究进展,推测使用高浓度甘油对红细胞作用时,四氢嘧啶可对渗透压起调节作用。目的:研究ectoine对红细胞渗透压的影响;研究ectoine作为渗透压调节物,应用于冰冻红细胞后,对红细胞质量的影响。方法:1)阐述红细胞在等渗ectoine、等渗乳酸钠、生理盐水、超纯水和等渗甘油中的吸光度动力学,研究ectoine对红细胞渗透压的影响。2)探索使用57%甘油(w/v)作为深低温保护剂时,冰冻并解冻红细胞的步骤,从而确定高浓度甘油冰冻红细胞的实验方法;使用不同浓度(1.5%、3.0%、4.5%,均为w/v)ectoine与57%甘油(w/v)联用作为实验组、国内商品化的复方甘油为对照组,冰冻红细胞,测定冰冻前后实验组和对照组细胞的回收率、变形性、渗透脆性、三磷酸腺苷(ATP)含量、果糖-6磷酸激酶(PFK)活力、丙酮酸激酶(PK)活力及乳酸脱氢酶(LDH)活力指标,初步研究ectoine与甘油联用冰冻红细胞,对红细胞质量的影响。结果:红细胞在等渗ectoine、等渗乳酸钠和生理盐水中的吸光度动力学相似,得出ectoine与乳酸钠和氯化钠相似,可调节渗透压;红细胞在超纯水和等渗甘油的吸光度动力学相似,证实溶液中甘油不可维持细胞膜稳定。3.0%ectoine与甘油联用与国内商品化的复方甘油冰冻后的红细胞相比,在回收率、渗透脆性、ATP含量、PK活力及LDH活力上,差异具有统计学意义;Ectoine与甘油联用冰冻红细胞,PFK活力在冰冻前差异不具有统计学意义。结论:Ectoine对红细胞的渗透压起调节的作用。在质量上,3.0%ectoine与甘油联用作为深低温保护剂冰冻红细胞,优于商品化的复方甘油的红细胞,提高冰冻红细胞的质量,也拓宽四氢嘧啶的应用范围。