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根据已发表的猪干扰素γ基因(PoIFN-γ)序列(Genbank登陆号：S63967)设计合成特异性引物，分别以ConA诱导的荣昌猪、内江猪外周血淋巴细胞总RNA为模板，用一步RT-PCR方法扩增出约600bp的目的片段。将目的片断克隆到pMD18-T载体上，酶切鉴定及序列测定结果表明为IFN-γ基因。该基因包括猪IFN-γ基因全部开放阅读框501个碱基，编码166个氨基酸。将所获得的荣昌猪、内江猪IFN-γ基因与其他已在NCBI刊载的猪IFN-γ基因序列进行核苷酸序列比较，同源性都在99％以上。荣昌猪、内江猪干扰素γ基因序列在Genbank登陆号分别是DQ902588、DQ913893。参考荣昌猪IFN-γ基因序列，设计特异性引物，以重组质粒pMD-R-IFN-γ为模板，分别亚克隆荣昌猪IFN-γ基因完整的ORF区(IFN-γ_s)和不含有信号肽编码序列的IFN-γ基因(IFN-γ_m)，并分别插入原核表达载体pET32(a)+，构建原核表达质粒pET32(a)+R-IFN-γ_s、pET32(a)-R-IFN-γ_m。分别转化大肠杆菌BL21，0.5mmol／L IPTG诱导表达4小时后，经SDS-PAGE电泳鉴定和Western-Blotting分析，原核表达质粒pET32(a)+R-IFN-γ_m表达的目的融合蛋白大小为36Kd，占细菌总蛋白的48.2％。融合蛋白经过0.3％SKL溶解，稀释透析复性后，具有一定的促猪外周血淋巴母细胞增殖反应活性。另将IFN-γ_s、IFN-γ_m基因分别插入原核表达载体pBV220，构建原核表达质粒pBV220-R-IFN-γ_s、pBV220-R-IFN-γ_m。分别转化大肠杆菌DH5α，42℃诱导表达4h，经SDS-PAGE电泳鉴定，原核表达质粒pBV220-R-IFN-γ_m表达的目的蛋白大小为16Kd，占细菌总蛋白的38.6％。