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背景和目的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是一种上皮源性恶性肿瘤,全球80%鼻咽癌发生在我国东南地区,尤其是广东和广西,局部区域的发病率可高达(20～50)/10万以上。鼻咽癌确切的发病机制迄今尚未明确,但目前普遍接受的是遗传因素、EB病毒感染及环境因素共同作用的综合致病假说。近年来,随着分了生物学研究水平的不断进展,鼻咽癌遗传易感性的作用逐渐被重视。“肿瘤血管新生假说”认为肿瘤的生长依赖血管生成,且体积大于等于3mm3的肿瘤生长必须依赖新生血管的生成才能继续生长。因此,病理性血管生成是肿瘤发生、发展的重要一步,其可有效促进恶性肿瘤的生长、周围浸润及远处转移。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是目前已知活性及专属性最强的促血管生成因子,它作为特异性有丝分裂原可促进血管内皮细胞增殖、分化及迁移,诱导新生血管形成,促进恶性肿瘤不断生长、侵袭及转移。近年来研究报道显示：在乳腺癌、胃癌、肺癌、食管癌及前列腺癌等患者的血液或肿瘤组织内可检测到VEGF蛋白的高表达,且肿瘤组织中VEGF蛋白含量明显高于周围正常组织。同时监测到血液中VEGF蛋白含量在治疗后显著下降。VEGF基因位于人类6号染色体短臂2区1带3亚带,至少有190多个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,VEGF基因可能通过影响VEGF蛋白的表达或者其活性的改变,从而改变个体对肿瘤的易感性。我们前期的研究也证实了VEGF-2578C/A及VEGFR-604T/C位点基因多态性与鼻咽癌的易感性相关。目前研究较多的位点有基因启动子区域的-2578C/A、-2489C/T、-460C/T及-1154G/A；5’端非转录区域的-634G/C及-7C/T；3’非转录区域的936C/T及1612G/A。其中基因启动子区域的-1154G/A位点得到了广泛的研究,并且研究显示VEGF-1154G/A位点多态性与乳腺癌、肺癌、前列腺癌及卵巢癌等易感性有关,但目前尚未见此位点与鼻咽癌易感性的相关报道。因此,本研究以我国鼻咽癌高发区广西为研究现场,通过对VEGF-1154G/A基因多态性在人群中的分布及EB病毒的检测,分析此多态性位点及EB病毒感染等环境暴露因素与鼻咽癌易感性的关系,为深入研究鼻咽癌发病的分子生物学机制、鼻咽癌易感人群的日常筛查和鼻咽癌治疗提供一定的理论依据。方法采用基于医院的病例-对照研究方法,采集197例鼻咽癌患者和197例对照个体的外周静脉血4ml,同时记录其病史和个人相关资料。用EB病毒衣壳抗原(VCA)IgA酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测血清中IgA抗体是否为阳性,同时用天根人血基因组DNA提取试剂盒提取血液样本DNA。应用DNA直接测序方法检测VEGF-1154G/A多态性位点的基因型。对照组基因型频率进行Hardy-Weinberg平衡分析(HWE),P>0.05表示有人群代表性。采用卡方检验对分类资料进行统计分析。用多因素非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、吸烟、EB-VCA-IgA抗体及肿瘤家族史等状况校正的相对风险度的比值比(odds ratio, OR)及其95%可信区间(confidence interval, CI)。所有实验数据均采用SPSS19.0软件进行统计分析,P<0.05被认为有统计学意义。结果1.鼻咽癌组的吸烟人数(40.6%)明显高于对照组(29.7%),两组分布差异具有统计学意义(x2=7.043,P=0.008);鼻咽癌组EB病毒衣壳抗原工gA抗体(EB-VCA-IgA)阳性率(91.4%)明显高于对照组(17.3%),两组分布差异有统计学意义(x2=218.03,P=0.001)；具有肿瘤家族史的鼻咽癌患者比例(14.2%)明显高于对照组(6.1%),两组分布差异有统计学意义(x2=8.01,P=0.004)。提示吸烟、EB-VCA-IgA抗体及肿瘤家族史是鼻咽癌的风险因素。2.VEGF-1154G/A位点共出现三种基因型：GG、GA、AA。健康对照组基因型分布频率符合Hardy-Weinberg平衡定律(p=0.08),说明对照组具有人群代表性。3.VEGF-1154G/A位点G、A等位基因在鼻咽癌组中的分布分别为59.6%、40.4%,在对照组中分别为73.1%、26.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。三种基因型GG、GA、AA在鼻咽癌患者组中的分布分别为39.6%、40.1%、20.3%,在对照组中分别为55.8%、34.5%、9.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。以携带GG野生纯合子基因型者为对照,携带AA突变纯合子基因型个体可能降低患鼻咽癌的危险性,是携带GG野生纯合子基因型者患鼻咽癌风险的0.19倍(OR=0.19,95%CI:0.07～0.50),AA突变纯合子基因型为鼻咽癌的保护基因型；与携带GG野生纯合子基因型者比较,携带至少一个A突变等位基因(GA+AA)的个体患鼻咽癌的风险降低(OR=0.52,95%CI:0.28～0.96)。4.由于吸烟、EB-VCA-IgA抗体及肿瘤家族史为鼻咽癌的风险因素,故进一步分析其与VEGF-1154G/A位点之间的交互作用。结果显示-1154G/A位点与吸烟、EB-VCA-IgA抗体及肿瘤家族史无交互作用(P>0.05)。结论1.吸烟、EB病毒及肿瘤家族史是鼻咽癌发生的风险因素。2.VEGF-1154G/A多态性位点与鼻咽癌的发病风险具有相关性,其中A等位基因能降低鼻咽癌的发病风险。3.VEGF-1154G/A与吸烟、EB病毒感染及肿瘤家族史在鼻咽癌的发生过程中无交互作用。