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本研究选用1日龄艾维茵肉鸡(AA)健雏240只,随机分成4组,分别饲以对照日粮和高镍日粮(高镍Ⅰ组:300 mg/kg,高镍Ⅱ组:600 mg/kg,高镍Ⅲ组:900 mg/kg,镍源:氯化镍,NiCl2),自由饮水,饲喂42天。采样时间为14,28和42日龄。以实验病理学、TUNEL、流式细胞术、荧光定量PCR和ELISA等方法研究日粮中添加不同水平氯化镍对雏鸡脾脏免疫功能的影响。结果如下:1.与对照组比较,高镍组雏鸡体重增长减慢,脾脏体积减小、重量减轻。白髓中淋巴细胞数量减少;超微结构观察可见内质网扩张和核膜扩张,凋亡细胞增多。2.脾脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低(P<0.05或P<0.01),谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05或P<0.01),丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05或P<0.01),抑制羟自由基能力下降(P<0.05或P<0.01)。3. TUNEL染色结果与流式结果显示,脾脏淋巴细胞凋亡数量和凋亡率显著升高(P<0.05或P<0.01),凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达水平和含量显著下降(P<0.05或P<0.01)。4.流式细胞术检测结果显示,CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞百分率不同程度下降,CD4+/CD8+比例降低。IgA+B细胞数量显著减少(P<0.05或P<0.01)。5.脾脏白细胞介素(interleukin IL, IL-2、IL-6、IL-10、IL-12),肿瘤坏死因子a (Tumor necrosis factor、TNF-a/LITAF),干扰素y (Interferon, IFN-y) mRNA表达水平和含量均显著下降(P<0.05或P<0.01),免疫球蛋白(immunoglobulinIg, IgA、IgG、 IgM)含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。6.实时荧光定量PCR (Quantitative real-time polymerase chain reaction)结果表明:Toll样受体(Toll-like receptor TLR, TLR4和TLR7)的基因表达水平均显著下调(P<0.05或P<0.01)。研究结果表明日粮中氯化镍超过300 mg/kg时脾脏会发生以下变化:① SOD、 CAT、GSH-Px活性下降,GSH含量减少,抑制羟自由基能力下降,MDA含量显著上升,引起脾脏氧化损伤;②镍的摄入引起脾脏淋巴细胞膜结构受损,凋亡细胞增多,造成脾脏的生长发育和免疫功能受损;③细胞因子(IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、 TNF-a/LITAF、IFN-γ) mRNA表达下调、含量降低,CD4+和CD8+T淋巴细胞比例下降,表明T淋巴细胞数量减少和功能受损,细胞免疫功能受到抑制;④IgA+B细胞数量减少及IgA、IgG、IgM含量降低,表明B淋巴细胞和体液免疫功能受损;⑤TLR4和TLR7mRNA表达下调,表明脾脏非特异性免疫受到影响。