萝卜-芥蓝异源四倍体不同世代表观遗传变异分析

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植物远缘杂交可以引起广泛的表观遗传变异,如:基因沉默、核仁显性、转座子激活、DNA甲基化变异等,而DNA甲基化尤其是胞嘧啶甲基化是表观遗传的主要调控机制之一。虽然这方面的研究报道已有很多,但DNA甲基化在杂交世代间的变异规律的研究并不多见。本文以萝卜-芥蓝异源四倍体的F4,F10为材料运用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)的方法研究了其甲基化水平及甲基化模式的传递和变异规律;并分别用甲基化抑制剂5-氮胞苷(5-AC)处理F4,F10,检测其受到逆境时不同世代对逆境的胁迫抗性;最后用电子显微镜观察用5-AC处理及未处理F4,F10的核仁结构,检测甲基化对核仁结构的影响。主要得到以下结论:1.F4,F10世代的萝卜-芥蓝四倍体整体甲基化水平差异不大,两者的甲基化位点多数稳定遗传,甲基化变异位点主要以两种变异模式为主,说明DNA的甲基化在远缘杂交世代传递中的遗传变异存在表观遗传重塑现象。2.甲基化抑制剂5-氮胞苷处理后,不论是整体甲基化水平变化还是甲基化的变异程度受到的冲击大小,F4受到的影响均明显大于F10代受到的影响,这可能与维持基因组甲基化水平的调控机制在不稳定世代中还不成熟,所以逆境对其冲击明显强于对稳定世代的影响。3.电镜下观察到5-氮胞苷处理的F4,F10的核仁结构随着处理时间的加长,核仁结构变形越来越明显,核仁中异染色质区域明显减少,核仁中各种结构逐渐消亡,说明DNA甲基化在调控核仁结构变化中起到了关键的调控作用。
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