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生殖器疱疹是由2型单纯疱疹病毒(Herpessimplexvirus)引起的生殖器疾病,目前在世界范围有超过5亿人感染HSV-2病毒。HSV-2病毒一旦感染,将终生潜伏在病人的感觉神经区,并不定时复发,给感染患者带来严重的生理创伤和心理压力。HSV-2对人类健康危害极大,目前唯一治疗生殖器疱疹的途径就是使用抗病毒药物,如阿昔洛韦,但也只是能一定程度上减少复发率,缓解感染病人的发病部位的病损程度,并不能彻底预防HSV-2的侵染,清除病毒的潜伏。所以,迫切需要针对HSV-2研发一种安全有效的疫苗。以往的HSV-2疫苗侧重于诱导中和抗力的水平而忽略了细胞免疫的重要性,结果均以失败告终,因此平衡体液免疫应答和细胞免疫应答对于HSV-2疫苗的有效性至关重要。HSV-2包膜糖蛋白gD2在HSV-2侵染细胞时起关键作用。gD2与HVEM的结合是病毒进入细胞的必要环节。以gD2为靶点产生的抗体如果能阻断gD2与HVEM的结合,即可阻止HSV-2的感染。再者,gD2本身具有丰富的抗体表位和T细胞表位,可以诱导产生相对较高的中和抗体和T细胞免疫应答。所以,本论文使用gD2作为亚单位疫苗的靶点。但是亚单位疫苗有着免疫原性低的缺点,需要配合免疫佐剂共同使用。细菌样颗粒(BLP)是一种新型的粘膜佐剂,BLP可以来源于灭活的乳酸乳球菌,该菌是一种安全的细菌,被广泛应用在益生菌饮料和奶产品的生产,例如奶酪和酸奶。BLP本身能够激活固有性免疫应答发挥佐剂的功能,固有性免疫应答的激活进而激活特异性免疫应答,最终可以诱导出持久的保护性免疫应答反应从而保护机体免受病原体的感染。同时,以BLP为佐剂的疫苗既可以选择鼻腔免疫方式,又可以选择肌肉注射的免疫途径,其效果比铝佐剂注射免疫后能够提高体液免疫应答水平。使用基因工程技术将HSV-2gD2蛋白与蛋白连接器(protan)融合表达,就可使gD2连接到BLP表面,进行免疫实验。本论文将gD2-protan融合蛋白表达后,与BLP结合,制备出安全有效的HSV-2疫苗,通过鼻腔免疫和肌肉注射两种途径免疫BALB/c小鼠,检测疫苗诱导产生中和抗体和引起细胞免疫应答的能力,攻毒后对小鼠的保护力,对小鼠生殖道内HSV-2的清除能力。同时,验证BLP作为一种新型疫苗佐剂的安全性和可行性。结果表明:以BLP为佐剂的gD2疫苗能够诱导产生较高水平的中和抗体,一定程度上能引起实验小鼠细胞免疫应答的能力。攻毒后对小鼠可以起到很好的保护作用,并且对小鼠生殖道内HSV-2病毒的复制起到一定的抑制作用。BLP作为一种新型疫苗佐剂,能够明显增强实验小鼠血清内特异性抗体滴度和中和能力,显著增加了 IFN-γ和IL-2的分泌,增强细胞免疫应答的水平,能够更好的在攻毒实验中保护小鼠,清除小鼠生殖道内的病毒载量,减轻小鼠感染部位的病变程度。