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背景在大多数人的认识中,亚硝酸盐是导致肿瘤发生的“罪魁祸首”,认为亚硝酸盐有很强的致癌作用;而国外许多研究表明,亚硝酸盐对心血管疾病有很好的保护作用。近年来,随着研究者对肿瘤领域研究的不断深入,有许多的证据表明原发或转移灶肿瘤组织或细胞中存在着数量不等的类似于普通干细胞的肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）亚群。然而,肿瘤干细胞究竟是如何被调控的还不清楚。大量研究表明肿瘤微环境中的一些生物介质可以导致普通的肿瘤细胞和肿瘤干细胞之间发生可逆性改变,从而使肿瘤细胞的恶性度发生改变或者发生多重耐药。而在这些生物介质中,就有亚硝酸盐的存在,基于这样的争议,所以研究亚硝酸盐如何调控肿瘤细胞的“干性”就显得尤为重要。目的本文旨在探讨,在肿瘤微环境中有较高含量,又是细胞关键的调控因子的亚硝酸盐是如何影响人肝癌中肿瘤干细胞样细胞表型的。方法采用DMEM/F12无血清培养基和超低吸附6孔板,在悬浮的情况下培养人肝癌SMMC-7721细胞,悬浮培养所获得球形成细胞用于后续的实验;流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期分布情况,Hoechst 33342染料孵育各组细胞,再用流式细胞仪检测各组细胞的边缘群细胞数量;肿瘤细胞自我更新能力的检测采用体外克隆形成实验和超低吸附6孔板细胞球形成实验;各组不同处理条件的肝癌细胞侵袭能力的检测采用Transwell细胞侵袭实验;各组不同处理条件的肝癌细胞的肿瘤干细胞表面标志物的表达差异采用流式细胞仪检测,westen blot实验结果用于检测各组不同处理条件的肝癌细胞的肿瘤干细胞表面标志物蛋白的表达量;各组不同处理的肝癌细胞耐药性采用MTT法检测各组细胞的活力。结果肝癌SMMC-7721细胞通过悬浮培养所获得的球形成细胞自我更新能力增强,在流式细胞术检测肿瘤干细胞标志物时发现经过亚硝酸钠处理的细胞比未经过处理的细胞肿瘤干细胞标志物表达量增加了,对化疗药物的耐受能力也明显增强。这些实验结果都提示:我们所获得的球形成细胞可能富集了数量比亲本细胞多的具有肿瘤干细胞特征的细胞。用亚硝酸钠(16mg·L-1)处理亲本细胞和球形成细胞后,流式细胞术检测结果显示经亚硝酸钠处理的组的G0/G1期细胞比例增加,S期所占的比例减少;边缘群细胞数量所占的比例增多;肿瘤癌干细胞标志物CD133、CD90和EpCAM的表达量增加;肿瘤细胞对化疗药物的耐受能力和对组织的侵袭能力增强。与亲本细胞相比,亚硝酸盐对球形成细胞的上述作用明显增强。结果表明,亚硝酸盐通过上调肝癌干细胞“干性”增强肝癌细胞侵袭能力。结论低剂量亚硝酸盐能够增加肝癌SMMC-7721细胞的干细胞表型,从而增强肝癌细胞的恶性度和耐药性,促进其迁移和侵袭。