高蓄能作物油葵的染色体核型分析及遗传转化

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葵花籽富含各种不饱和油,这些油不仅可以作为食用油,而且可以做成生物柴油。现在日本,泰国已经开始研制利用葵花籽油作为生物能源,并投入使用。本实验在细胞学和转基因方面,对向日葵进行了以下几方面的研究。通过0.05%秋水仙素水溶液、对二氯苯饱和水溶液、0.002 mol/ L8-羟基喹啉水溶液、4℃水溶液四种不同的溶液,处理8种向日葵根尖细胞。观察向日葵根尖细胞有丝分裂及核型分析。结果表明:四种处理方法中,低温处理能有效地增加中期分裂相,秋水仙素次之,对二氯苯对纺锤体的抑制作用不够强,8-羟基喹啉的效果最差。对向日葵的细胞学观察说明, 8种基因型的核型图像匀称,略呈梯度递减。FPS是倍半萜合成中的一个关键酶,可以提高植物的油含量,PSY、lycB是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶,可以提高作物的含油品质,利用农杆菌介导向日葵的遗传转化。本实验以向日葵种子为外植体,建立了向日葵的遗传受体体系,转化了PSY、lycB、FPS三种基因。经PCR和PCR-Southern分析证明PSY被转入向日葵中。并对影响遗传转化的因子进行了研究。结果表明:利用根癌农杆菌对向日葵F53、F51进行转化,侵染浓度OD6oo=1,切子叶侵染前干燥4小时,侵染时间6分钟,预培养和共培养各2天,潮霉素适宜筛选浓度2~5mg/L,卡那霉素适宜筛选浓度20~40mg/L。植物激素与筛选剂相对应,当用潮霉素筛选时用1mg/L的IBA,当用卡那霉素筛选时用1mg/L的NAA。潮霉素的筛选效果要好于卡那霉素。最后得到4株阳性PSY转基因向日葵。在葵花籽油中加入适当的低凝固点的化合物,可以大大降低葵花籽油的凝固点。
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