饲用益生菌的选育及其培养条件研究

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本课题以从健康的仔猪粪便中分离出的15株芽孢杆菌为研究对象,通过对它们体外益生特性研究,从中筛选出一株对猪肠道致病菌抑制作用明显,耐酸耐胆盐,耐高热,产酶活性高的芽孢杆菌B8,对其进行鉴定和培养条件研究,现主要研究成果如下:(1)饲用益生菌的分离筛选:通过初筛和复筛,分离出有较好抑菌活性的芽孢杆菌15株,分别编号为B1、B2、B3…B15。(2)饲用益生菌的益生特性研究:对分离的15株芽孢杆菌进行益生特性研究,发现芽孢杆菌B8具有优良体外益生特性,对猪肠道的常见致病菌大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌均有较强的抑制作用,抑菌圈直径分别达到了19.42,17.31,19.85;在抗逆性研究中,菌株B8在90℃水浴中加热10min,其存活率达到了86.5%,具有优良的耐高热特性;在耐人工胃液和人工肠液的研究中,菌株B8在pH值为2的人工胃液中培养3h,存活率达到了81.2%,在胆盐浓度为0.3%的人工肠液中培养3h,存活率达到了82.9%,具有良好的耐酸耐胆盐特性;对其进行产酶特性研究,发现B8具有良好的产蛋白酶和淀粉酶活性。(3)饲用益生菌的鉴定:参考《伯杰细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对菌株B8进行形态学特征和生理生化特征研究,初步鉴定其为枯草芽孢杆菌。(4)饲用益生菌的最佳培养条件研究:对菌株B8的液体培养条件进行研究,其最佳的培养条件为:接种菌龄15h,培养温度34℃,转速180r/min,接种量7%,装液量30%,初始pH值7.5,此外又对菌株的生长周期进行了研究,绘制了菌株B8的生长曲线,对其生长规律进行探索,研究发现菌株B8具有微生物典型的生长规律,生长周期分为延滞期,对数期,稳定期,衰亡期,其中0-6h为延滞期,6-15h为对数期,15-30h为稳定期,30h以后生长进入衰亡期,在菌株B8生长周内对其产芽孢情况研究发现,菌株在对数期开始有极少量芽孢产生,在稳定期的15-21h内,芽孢开始大量形成,21-30h,芽孢数比较稳定,30h后芽孢数开始减少。
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