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目的:探讨NOD/SCID小鼠移植入脐带血CD34+细胞后免疫细胞重建的现象,建立hu-SRC-NOD/SCID人鼠嵌合模型并观察其人源免疫细胞在小鼠体内的分化发育水平及存活时间,为后期模拟恶性淋巴瘤患者机体免疫状态打下基础。
方法:免疫磁珠法分选脐血CD34+细胞,经外侧尾静脉移植于亚致死量(X射线,300cGy)照射的NOD/SCID小鼠,1×105/只。移植后4~10周FCM动态监测小鼠外周血人CD45+、CD3+、CD56+细胞的表达;10周后PCR检测小鼠骨髓人Alu基因的表达,IHC检测小鼠脾脏人CD3+、CD56+细胞的表达。
结果:经免疫磁珠法分选可获足量CD34+细胞,纯度80~91%。300cGyX射线照射可达到良好的清髓效果。移植后各组小鼠存活率为:照射移植组37.5%(6/16);照射对照组0(5/5);正常对照组100%(5/5)。移植后4周,移植组所有存活小鼠外周血均可检测到人源性CD45+、CD3+、CD56+细胞的表达,4周时CD45+细胞的表达水平3.7%~6.6%,8周时达到高水平的表达(9.9%~15%),10周仍有较高的表达量(5.4%~11.2%)。10周时移植组所有存活小鼠骨髓细胞均检测到人Alu基因的表达,脾脏均检测到人CD3+、CD56+细胞的表达。
结论:移植脐血CD34+细胞成功地建立了hu-SRC-NOD/SCID模型,该模型具有高植入率。在建立的模型中检测到人源性CD3+、CD56+细胞。