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目的:研究黄根[Prismatomeristetrandra(Roxb.)K.Schum,PT]醇提物抗实验性肝损伤、肝纤维化的作用,并初步探讨其作用机理。
方法:①因黄根醇提物毒性低,无法测出其LD50,故只测其MTD。②将实验动物随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、阳性对照组、黄根醇提物高、中、低剂量组。ig给药,小老鼠黄根醇提物给药剂量为16、8、4g生药/kg。采用CC14,D-GalN造成小鼠急性肝损伤,分光光度法检测小鼠血清中ALT、AST活性,并计算小鼠肝脾指数;BCG-LPS造成小鼠免疫性肝损伤,分光光度法检测小鼠血清中ALT、AST活性,并检测肝组织中SOD和GSH-PX活性,以及MDA水平,计算小鼠肝脾指数。采用光镜观察上述3种模型小鼠肝脏组织病理学改变。③分组和给药方法同②,大鼠黄根醇提物给药剂量为12、6、3g生药/kg。采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,分光光度法检测大鼠血清中ALT、AST活性及其TP、ALB含量,并计算白蛋白与球蛋白的比值;放免法检测血清中的肝纤维化四项,即HA、LN、PCⅢ、COLⅣ;分光光度法检测肝组织中SOD、GSH-PX活性和MDA水平,碱水解法检测Hyp的含量,免疫组化检测法COLⅠ、COLⅢ及TGF-β1的表达,并用光镜观察肝脏组织病理学改变。计算大鼠肝脾指数。
结果:①黄根醇提物MTD测定为2080g生药/kg体重,相当于成人(50kg)临床用量(0.6g生药/kg)的3466倍,无一动物死亡,主要脏器亦无明显的病理性改变。②黄根醇提物能显著对抗由CC14、D-GalN所致的小鼠血清中ALT、AST活性(p<0.01)升高、肝脾指数的增加(p<0.01),且低剂量组效果较好;能显著对抗免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性(p<0.01)升高、肝组织中的MDA水平(p<0.01)和肝脾指数的增加(p<0.01),增加肝组织中SOD、GSH-PX活性(p<0.01)。病理组织形态学检查表明,黄根醇提物各剂量组能明显减轻小鼠急性实验性肝损伤病变程度,使肝细胞再生明显,但黄根醇提物各剂量组与模型对照组比较肝细胞仍然存在一定程度的水肿、脂肪变性,偶伴有点状坏死,汇管区少量炎细胞浸润。③黄根醇提物能明显降低肝纤维化大鼠肝脾指数的增加(p<0.01),显著对抗其血清中ALT、AST活性的升高(p<0.01),降低其血清中HA、LN、PCⅢ、COLⅣ、GLB含量(p<0.01),升高其血清中的TP、ALB含量(p<0.01)和A/G的值(p<0.01);能降低肝组织中MDA水平和Hyp含量(p<0.01),增强肝组织中SOD、GSH-PX的活性(p<0.01)。病理组织形态学检查表明,黄根醇提物能明显减轻大鼠肝纤维化病变程度,减少纤维化组织面积,降低肝组织中COLⅠ、COLⅢ和TGF-β1的表达。
结论:黄根醇提物具有显著的抗实验性肝损伤、肝纤雏化的作用。研究发现,其对肝脏保护作用的机制可能为清除氧自由基,减轻肝脏脂质过氧化,保护细胞膜,并促进蛋白合成、减少肝脏胶原的合成,从而起到保护肝细胞的作用。本文实验属首次报道。