T细胞受体γ链独特型DNA疫苗诱导特异性免疫反应的实验研究

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lu_bo_123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:大多数T细胞肿瘤表面有TCR独特型抗原,可作为肿瘤特异性抗原用于免疫治疗。应用TCR独特型DNA疫苗有可能激发抗肿瘤独特型免疫反应。本文观察TCR独特型DNA疫苗诱导BALB/C小鼠抗肿瘤免疫反应的情况。 方法:本文采用RT——PCR的方法扩增JurkatT淋巴瘤细胞特异性重排的TCRγ可变区基因片段,克隆到真表达载体pcDNA3中,经序列测定无误后,碱裂解法大量提取质粒,制备DNA疫苗。选用24只BALB/C小鼠,分三组进行免疫:(1)pcDNA3组:每次注射pcDNA3100μg;(2)pcDNA3/TCRγ组:每次注射扣02丫体k叫八【义7,’卜。【(”y渊叭S型*A疫茵诱导特异性免疫反口的实验盼劳pc***}**R Y]00卜g;臼)pc**。’**R Y一L一2组:每次往 月****/**RY100卜9及人重组1*一2 5以g。采用肌肉注自力法免疫小鼠,每两周兔疫一次,共三次。间接免疫荧光法检测小鼠血清中抗体生成情况,应用 SPSS刀统计分析软件,将三纠小鼠血清抗体滴度取对数行LS*一t检验。RT一P*R it检测重组质粒在小鼠肌肉中的mRNA表达。 结果:本文构建了 Jurkat淋巳媲细胞系独特型 TCR v VI DNA重组载体 pCDNA。1CR Y。其寻达序列长 333hp。对序列进行蛋白抗原性分析发现其中包括 3个抗原决定族。用 TCR Y VI独特型DNA重组载体作为疫苗免疫小鼠,结果表明 pCDNA3汀CR Y组及PCDNA3厅CR Y—IL—2组小鼠1血肩中全部产生了特异性抗独特ffo抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰。在同一取血时间,W**儿1*RY一几一二 组小鼠抗体滴度均高于pCDNA3/TCR Y组(P < 0*1)。pCD*A3/TCR Y组小鼠抗体滴度最高达1:16小pc***。汀*R丫一1*一2组小鼠抗体的滴度最高达1:640。在 pCDNA3/TCR Y组及 pCDNA3/TCR Y一IL一2组小鼠中用RT——PCR iL均检测到了重组质粒在肌肉中的mRNA表达。 结论:1、成功构建JU水扯细胞系**R。独特型**A重组质 勺I以,I”卜、。卜>什。【<T一Hb引}V猢9#型0M疫苗诱导桔异性免疫反应的实验研究粒pcDNA31CRH 其表达序列长333hp,对序列进行蛋白抗原性分祈友现其中共包括3个抗原决定簇。 2、首次证实人工制备的TCR;表达载体作为TCR独特型DNA疫苗可以诱导小鼠产生特异性抗淋巴瘤细胞独特型抗体。 3、应用IL上免疫佐剂可使TCR。独特型DNA疫苗诱导的抗体滴度明显增高。
其他文献
本文以2014年相关数据为基础,分析了我国兽用生物制品行业的企业现状、产品现状、市场现状和研发现状,查找了行业存在的问题,提出了促进行业发展的对策与建议。
肾母细胞瘤(Nephroblastoma)是小儿最常见的腹部恶性肿瘤之一,占所有小儿实体肿瘤的8%。Max Wilms于1899年曾对该瘤的特征发表了详细的描述,故又命名为wilms’瘤。肾母细胞瘤发生
通过对珠海市乾务赤坎大联围海堤加固达标工程90 km海堤及100多座穿堤建筑物淤泥质软土地基的多种处理方案进行实例解析及工程实施效果评价,归纳总结出具有一定实践指导意义
<正>好几年前,窄幅卷筒纸胶印在欧洲只用于印刷连续表格、大宗账单邮件、照片纸袋、标签和类似的产品,几乎没有用于包装印刷的。而在美国则完全相反,30多年前,卷筒纸胶印就用
猪肉中磺胺类兽药物残留基体标准物质是分析测量猪肉中磺胺类残留量的重要量具,其中猪肉中磺胺类的高准确定值方法是研制猪肉中磺胺类兽药残留基体标准物质的关键技术保障,但
今年是农历癸未年,也就是人们常说的羊年.一提起羊,人们马上会想起日常生活中的羊毛大衣、羊皮袄、羊绒衫、东来顺的涮羊肉或是新疆的羊肉串等等.除了这些身上衣和盘中餐,羊
澳门自1999年12月20日回归祖国以来,不仅在文化历史方面继续有所成就,于2005年7月已成功地将历史城区申报为世界文化遗产;而且在经济方面也有了突破性发展,澳门的观光旅游业,休闲
《生活》周刊由黄炎培创办,在邹韬奋的苦心经营之下逐步成长.成为民国时期发行量最大的刊物之一。《生活》周刊发展的历程在一定程度上体现了邹韬奋思想的变迁轨迹。因此,本文将
灵动学生的培养在于德育和智育双管齐下。有效的智育不一定带来有效的德育,而有效的德育能带来智育的成效。灵动教育通过构建灵动课程、组织灵动教学、践行灵动管理,实施灵动
粗糙聚类思想自提出以来,在软划分聚类方面取得了广泛应用,但其阈值参数常主观确定,未能考虑数据集本身的特性。基于阴影集(Shadowed Sets)的优化理论给出了一种客观的阈值选择