【摘 要】
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蛋白质作为生命体的基本组成物质,参与了机体的各种生命活动。近年来,蛋白质分析得到了科学界的广泛关注,并发展了一系列蛋白质分析方法和仪器。然而蛋白质常存在于复杂样品
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蛋白质作为生命体的基本组成物质,参与了机体的各种生命活动。近年来,蛋白质分析得到了科学界的广泛关注,并发展了一系列蛋白质分析方法和仪器。然而蛋白质常存在于复杂样品基质中,体系中的其他物质如有机小分子、无机盐及其他蛋白质等对目标蛋白的检测存在严重干扰。因此,亟需发展出有效的样品前处理方法对基质中的目标蛋白进行分离和纯化。氧化石墨烯作为新型吸附剂,因其较好的生物相容性及可控的表面性质展现了在蛋白质分离领域的应用潜力。氧化石墨烯表面的含氧基团不但可以与目标蛋白产生氢键、静电等相互作用,还可用于功能化修饰,提升材料对蛋白质的吸附性能及吸附选择性。然而,氧化石墨烯在水中具有很高的分散性,不易与水溶液分离,这限制了其对蛋白质分离的应用。因此,在氧化石墨烯表面负载磁性颗粒,可以使材料在外加磁场的作用下完成与基质的快速分离。本论文探究了氧化石墨烯功能化修饰的方法,分别将氨基酸、聚乙烯亚胺共价键合在氧化石墨烯表面,再利用共沉淀方法成功合成了功能化磁性氧化石墨烯复合材料。材料的表征结果表明修饰基团已被成功键合在氧化石墨烯表面,且材料表面附着有Fe3O4磁性颗粒,具备顺磁性,可在外加磁场下从样品溶液中迅速分离。本文分别探索了两种功能化磁性氧化石墨烯复合材料对蛋白质的吸附性能,优化了影响材料对蛋白质吸附容量的一系列条件。吸附实验结果表明,修饰了氨基酸的复合材料(AMGO@Fe3O4)对牛血红蛋白具有很高的吸附容量(868.3 mg g-1),且相比于氧化石墨烯材料具备更优异的吸附性能。同时,AMGO@Fe3O4可从牛血红蛋白与牛血清白蛋白混合液中选择性吸附牛血红蛋白,且材料易回收,可重复使用至少三次。该材料已成功应用于对实际样品牛血浆中牛血红蛋白的分离富集。而修饰了聚乙烯亚胺的复合材料(GO-PEI@Fe3O4)相比于氧化石墨烯材料对牛血清白蛋白具备更优异的吸附性能。本文建立的分析方法具备良好的精确性、重现性和稳定性。其作为一种简单、高效的蛋白质分离技术,展现了对实际样品的应用潜力。
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