近视是最常见的屈光状态异常，关于其发生机制，尚无定论。形觉剥夺学说认为影响视网膜正常成像的多种因素，均可导致眼轴延长，形成近视。这一学说对近视发生机制的研究起到重要的推动作用。近年来，生长因子与形觉剥夺性近视的关系逐渐引起人们重视。本研究拟建立小鸡形觉剥夺性近视模型，采用链酶亲和素—生物素—过氧化物酶复合物免疫组化技术(SABC)，检测视网膜中bFGF的表达，并采用双抗体夹心ELISA技术观察不同遮盖时间巩膜bFGF含量的动态变化，以探讨形觉剥夺性近视的发生机制及bFGF与形觉剥夺性近视发生、发展的关系。 1．bFGF在形觉剥夺性近视眼视网膜中表达的研究 材料与方法：选用出生后2天、健康无眼病的雄性海兰鸡雏30只，将右眼以半透明眼罩遮盖作为形觉剥夺眼，左眼为开放对照眼。2周后采用带状光检影镜于自然状态下检影验光后断颈处死并摘出眼球，用游标卡尺测量眼轴长；常规制作3μm厚石郑州大学200二年研究生论文 肝＊F在形觉剥夺性近视形成及发展中作用的研究蜡切片，HE染色，光镜下观察视网膜及巩膜组织形态学变化；采用S朋C技术，检测视网膜中bFGF的表达。 结果：（1）对照眼的屈光度平均为＋0．40f0．28D，遮盖眼的屈光度平均为上0．15士7．38D，两者差异有显著性意义（尸＜0刀1）眼轴长较对照眼明显延长，差异有显著性中功刀l’），证实形觉剥夺导致了近视性屈光异常。（2）e染色显示：遮盖眼后极部视网膜变薄，巩膜软骨层变厚、纤维层变薄。3）免疫组化染色显示：bFGF阳性细胞表现为细胞浆中出现黄色或棕黄色颗粒，主要分布于视网膜内核层及神经节细胞层，在内核层，主要为无长突细胞。视网膜每油镜视野平均阳性细胞数，对照眼内核层及神经节细胞层分别为 1．71士 0石 1个、3刀6士 1＊ 0个，遮盖眼内核层及神经节细胞层分别为 0．71士 0．52个、l．77士 1．28个，与对照眼相比，bF＊F阳性细胞数较少，差异具有显著性中＜0刀1人2．形觉剥夺敝视发展过程中巩膜bFGF含吕的动态变化 材料与方法：选用新生雄性海兰鸡雏 100只，模型建立方法同第一部分，分别于遮盖l、3、5、7、14天时去除眼罩，验光测量同前。在冰台上用直径smm的环钻钻取后部巩膜组织，并除去附着的眼外肌等，每5个眼球作为1个标本，剪碎、匀浆。低温离心 10，000 pm 20分钟，取上清液即为待测样本。选用双抗体夹心ELISA法测定巩膜中bFGF含量。 结果：门）屈光状态及眼轴长的变化：遮盖眼于遮盖1、3。5、7、14大屈光度分别为＋2＊4t0＊OD、－2．70t2．ZID、－9．87ti．37D。－14＊sll．99D、－22＊312．37D，目 辛 氏分别 为 8．8110．16mm、 2 郑州大学2002年研究生论文 惭＊F在形觉剥夺性近视形成及发展中作用的研究 9＊卜 二gmm、9．3 11。0．19mm、9．2510二4mm、9．7210．33mm，屈光 度与眼轴长呈高度负相关（，心．975，尸二0刀05）对照眼出生后为轻 度远视，随着时间延长趋于正视化。双眼屈光度、眼轴长差异有 显著性…＜0刀5X随遮盖时间延长差异更加明显八2）巩膜旺＊F 含量的变化：遮盖眼巩膜 bFGF含量于 1、3、5、7、14天时分 别为 127．14if4．53 pg／ml、113．gi士门．85 pg／ml、162＊4ti6 ＊4 pg／ml． 135．80t4．92pg／ml． 16．63ti8．94 pg／ffil，对照眼巩膜 bFGF 含量分别为 161．54t28＊2 pg／ml、277．74128．74 pg／ffil、288．42t35．12 pg／ml、288．10t41．34 pg／ml、283＊615．24 pg／ml，在同一遮盖时间， 遮盖眼巩膜中旺诽含量均低于对照眼，二者差异具有显著性中 ＜0＊引。 结论：（）形觉剥夺可导致近视性屈光异常，后极部视网膜 变薄，巩膜软骨层变厚，纤维层变薄。Q）视网膜bFGF阳性表 达主要位于无长突细胞及神经节细胞；遮盖眼视网膜中bFGF阳 性细胞数减少，可能与形觉剥夺性近视的形成有关。门）遮盖眼 较对照眼巩膜中bFGF含量降低，说明bFGF可能对形觉剥夺性 近视的发生、发展起重要作用，巩膜的变化可能是形觉剥夺性近 视形成的重要因素之一。