基于磺基水杨酸的水产品氟喹诺酮类药物酶联免疫检测前处理技术研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sxlijx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
免疫分析法是以抗原与抗体的特异性、可逆性结合反应为基础的新型分析技术。然而,免疫检测的大多前处理过程与常规大型仪器相同,有机溶剂提取,SPE、LLE或LPE净化,不能更好的体现免疫检测的快捷性;而仅仅采取简单的提取,可能会造成假阳性或假阴性的结果,大大降低免疫检测的灵敏度及可靠性,这主要是由于基质对免疫分析的干扰。因此,本论文旨在建立既能消除基质影响又简便快速的样品前处理方法,从而最大限度地实现现场快速检测的目的。本论文首先以三种鲆鲽鱼(大菱鲆、牙鲆、舌鳎)为主要研究对象,研究探讨了加热,有机溶剂等对水产品药物检测中的主要基质蛋白质的去除效果及基质效应性,发现仅仅靠加热并不能有效的去除蛋白基质的影响,有机溶剂能有效的去除蛋白基质的影响,但对免疫检测有着较大影响,需通过加热、旋蒸等方法去除,这同时也增加了样品前处理的复杂性。通过免疫印迹及SDS-PAGE等方法探究了不同种类和浓度的酸对鱼肉蛋白基质的去除效果,结合其对免疫分析的影响,发现低浓度的磺基水杨酸既可消除蛋白基质的影响又对检测影响较小。在此基础上,对提取剂浓度、pH值等条件进行优化,建立了简便快速的氟喹诺酮类药物样品前处理方法并进行了方法检测限、精密度和准确度的测定,此外,还与常规样品前处理方法进行了比较,结果表明,检测限为0.1μg/L,工作曲线是0.1-25.6μg/L,对三种鲆鲽鱼中氟喹诺酮类药物残留进行检测,鱼肉样品经过2%磺基水杨酸提取后即可消除基质效应,回收率为68%~94%,变异系数小于20%,与常规前处理方法相比,所建方法不需要净化过程,前处理时间与传统前处理方法的45~60min相比,仅需20~30min,且不需要有机溶剂和特殊仪器。在新建样品前处理方法的基础上,进一步将此前处理方法应用于不同来源的鱼虾上,发现虽然不同来源的鱼虾蛋白质组分不同,但2%磺基水杨酸均能消除蛋白质基质影响,鱼虾样品基质曲线与标准曲线的吻合度较好,回收率在65-95%之间,变异系数小于20%,说明此样品前处理方法对水产品均能应用。通过高效液相色谱检测方法,对建立的氟喹诺酮类药物检测方法进行数据确证,两种方法的检测结果一致性很高,线性相关系数R。值在0.97以上,表明本方法可应用于水产品中氟喹诺酮类药物快速定性及定量分析。本研究简化和优化了酶联免疫检测水产品中氟喹诺酮类药物的新型样品前处理方法,首次使用磺基水杨酸作为样品前处理方法的提取剂,样品经过提取后即可消除基质效应,不需要净化步骤即可检测,是有效简便的基质效应消除方法和快速简便的样品前处理方法,更好体现免疫检测的优势。
其他文献
拉链与面料缝合之后容易产生沿缝纫线的长度增缩、凹凸不平、偏移歪斜等缝纫缩皱现象,是影响服装品质的主要因素。而拉链缝纫平整度用来描述拉链的这种缝纫皱缩现象和程度。
本文以离子选择性电极理论为依据,结合作者的工作实践,探讨了氯离子选择性电极在水质分析中的应用。
9·11事件的发生以及近年来恐怖主义活动在全球范围的泛滥使得学术界关于亨廷顿"文明冲突论"的争辩再次升温,一些学者将全球恐怖事件的频繁发生看作文明冲突时代的到来.
目的探讨药物治疗高危人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的临床疗效及阴道局部免疫功能的变化。方法选取2015~2017年在华北理工大学附属医院就诊的78
<正>当下,街角边五颜六色的共享单车,成为城市一道绚丽的风景线。从今年年初开始,单车浪潮席卷至今,但社会上对共享单车的评价却不一。有人认为,这是共享经济又一次的壮举,大
八仙戏,不同于一般的戏曲演出活动,有着明显的仪式特征,广泛地被整合于不同地区的酬神演戏活动,是各地方戏中的演出惯例,并已成为温州苍南县的非物质文化遗产项目之一。本文
比伐卢定(bivalirudin)是一种新型直接凝血酶抑制剂,2000年被美国食品药品监督管理局批准应用于临床。比伐卢定是水蛭素的衍生物,通过抑制凝血酶的活性位点而起效,国外将其与
本文通过对三维可视化系统的研究,阐述了三维空间模型的构建、可视化系统的结构设计以及模块实现方法,希望能为三维可视化方面的研究提供参考。
中国服装品牌打造品牌最大的障碍是时尚话语权的缺位,根源则在于对于中国文化挖掘与发挥的缺失及对于本土文化自信的不足。那些曾被我们遗忘、忽略、丢失的文化传统,正是中国服
本文介绍了目前国内的超市购物环境现状及存在的问题;然后利用现有的机械结构设计出能够折叠并被动爬楼的购物车;最后再根据红外感应技术设计出顾客在购物过程中也能自动累加