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BAG蛋白是一类在进化上高度保守的蛋白家族,因其蛋白分子的C端都含有至少一个保守的BAG结构域而得名。哺乳动物BAG蛋白通过BAG结构域直接结合到Hsp70/Hsc70的ATPase结构域上促进后者对底物的释放,是分子伴侣活性的调节者,参与调节细胞凋亡、增殖、分化、逆境反应及细胞循环等一系列的细胞过程。植物中也存在这类多功能蛋白,它们在病原体入侵、非生物因素胁迫反应以及植物发育等一系列类似凋亡的细胞过程中起着重要作用,与动物BAG蛋白在功能上非常相似,但它们在植物体内发挥作用的分子机理尚不清楚。本文在综述了前人关于BAG家族蛋白研究进展的基础上,以拟南芥AtBAG4蛋白为代表,通过免疫共沉淀方法探讨了拟南芥体内AtBAG4与热激蛋白Hsc70/Hsp70之间的结合作用。我们分别把拟南芥的AtHsc70、AtBAG4、AtBAG7的cDNA编码序列亚克隆到原核表达载体pET32a（+）,得到重组载体pET-AtHsc70、pET-AtBAG4、pET-AtBAG7等,这些质粒经测序验证后转入宿主菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达所需蛋白。然后通过NI-NTA亲和层析纯化融合蛋白,将融合蛋白作为抗原免疫家兔获得抗AtHsc70、AtBAG4蛋白的多克隆抗体。Western印迹结果显示,我们得到的抗体具有较高的特异性,可以作为下一步研究工作的工具。为了探索拟南芥体内AtBAG4与Hsc70蛋白间是否存在结合作用,我们以拟南芥幼苗为材料在非变性条件下提取总蛋白,将纯化的抗AtBAG4、AtHsc70抗体分别加入到总蛋白提取物中,用固定化的ProteinA分离抗原抗体复合物,经SDS-PAGE和Western转膜后,用抗AtBAG4、AtHsc70抗体去检测相应的抗原。我们在抗AtHsc70抗体的沉淀物中检测到了AtBAG4,同时在抗AtBAG4抗体的沉淀物中也检测到了AtHsc70。这说明在拟南芥体内AtBAG4与Hsc70之间存在着结合作用。我们的实验结果与本实验室用酵母双杂交方法所得到的结果是一致的,所不同的是,我们提供的是拟南芥细胞内BAG蛋白与Hsp70存在着结合作用的实验证据,由这些结果我们可以推测二者在功能方面一定存在着联系。同时,本实验室关于AtBAG4突变体表型方面分析的结果也显示,突变体对盐胁迫较野生型敏感,说明AtBAG4在拟南芥的抗盐胁迫反应中起着重要作用。因此,BAG蛋白与Hsp70的相互作用在抗盐胁迫反应中的意义是今后研究的方向,我们目前的工作为此提供了重要的实验依据。