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一、大鼠同种异体在体异位节段小肠移植模型的建立 目的 为研究抗小肠移植排斥治疗提供良好的动物实验模型。 方法 选用大鼠进行同种异体异位节段性小肠移植。重建供肠血管采用腹主动脉-肾下腹主动脉吻合以及门静脉-肾下下腔静脉吻合。 结果 共施行96例移植手术，模型稳定后的56例小肠移植5天成活率为85.71％。 结论 本模型制作成功率较高、适合小肠移植排斥研究。 二、大鼠移植肠局部CTLA4Ig基因转染的可行性研究 目的：探讨CTLA4Ig基因能否在移植小肠局部转染表达。 方法：移植前经肠系膜上动脉给供肠灌注脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA重组质粒，应用免疫组织学及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)观察移植小肠中CTLA4Ig转基因产物的表达。 结果：免疫组织学及RT-PCR结果显示在移植后48h移植小肠中有大量CTLA4Ig转基因产物的表达。 结论：经肠系膜上动脉体外灌注脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA重组质粒可有效转染移植小肠。 三、CTLA4Ig局部转基因对小肠移植急性排斥的治疗作用 目的：研究CTLA4Ig基因在移植小肠局部表达及其表达产物对急性排斥反应的治疗作用。 方法：建立SD→Wistar的大鼠异位小肠移植模型，并随机分为实验 南京医科大学博士学位论文组(CTLA4工g转基因组)和对照组(非转基因组)。实验组供肠移植前经肠系膜上动脉注入脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA重组质粒，术后应用免疫组织学检查移植小肠中CTLA4工g转基因产物的表达。移植术后3，7，10d分别获取各组的移植小肠进行组织学检查及细胞凋亡测定。结果:经CTL人4 19 cDNA处理的小肠在移植术后可见大量的CTL人419表达。对照组移植肠在术后7，10d分别出现I，11度急性排斥反应，同时凋亡细胞数量显著增加。实验组移植肠术后未见排斥反应的病理学证据，凋亡细胞偶见。结论:CTLA4 19基因可在移植小肠局部转染表达，其表达产物可防止移植术后急性排斥反应的发生。四、移植肠局部C TLA4Ig转基因对受体免疚排斥反应的影响目的:研究CTLA4Ig基因在小肠局部转染表达及其表达产物对受体免疚排斥反应的影响。方法:移植前经肠系膜上动脉给供肠灌注脂质体包裹的CTLA4 Igc洲A重组质粒，应用免疫组织学及逆转录多聚酶链反应检测移植小肠中CT以4 19转基因产物的表达，并观察受体对供肠及供者同系鼠皮肤移植的排斥反应。结果:移植术后至少28d内移植小肠中有CTLA 419转基因产物的表达，18例移植小肠中的11例在受体内的存活时间超过90d，但移植肠长期存活的受体排斥供者同系鼠皮肤移植，皮肤移植排斥同时激发受体对移植小肠的排斥‘结论:经肠系膜‘_L动脉依“!、灌注脂质体包裹的CT工，刊烤巾狱可有效南京医科大学博士学位论文转染移植小肠，并诱导受体对移植小肠的免疫耐受，但移植肠局部cTLA4 19基因转染不能诱导出供者特异的外周耐受状态。