论文部分内容阅读
种间杂交是有性杂交育种中拓宽选种遗传基础的重要途径之一,但有棱丝瓜[Luffa acutangula（L.）Roxb.]与普通丝瓜[Luffa cylindrica（L.）Roem.]杂交产生的F1果实呈现苦味,其后代材料也多有苦味,导致丝瓜丧失经济价值,育种中需要去除苦味。本研究利用不苦的有棱丝瓜纯合自交系‘4-0-0-0’与不苦的普通丝瓜纯合自交系‘48-1-0-0’作为亲本分别构建了两个回交群体,对果实苦味基因进行了定位,以期建立分子标记辅助选择体系,提高育种效率。试验获得的主要结果如下:1、（‘48-1-0-0’ב4-0-0-0’）ב48-1-0-0’和（‘4-0-0-0’ב48-1-0-0’）ב4-0-0-0’两个回交群体中果实苦、不苦两性状的比例为1:1,都符合孟德尔单显性基因遗传规律,推测有棱丝瓜、普通丝瓜中各含1个果实苦味基因,丝瓜苦味性状遵循双基因显性互补遗传规律。2、应用SSR标记,利用（‘48-1-0-0’ב4-0-0-0’）ב48-1-0-0’BC1群体构建的分子遗传图谱含13个连锁群,105个SSR标记;遗传总距离覆盖835.6 cM,平均遗传距离为7.96 cM;每个连锁群平均长度为64.3 cM;有棱丝瓜果实苦味的相关基因Labt被定位在LG7上,位于标记SGC196与SGE292之间,遗传距离分别为4.0 cM与6.2 cM。利用（‘4-0-0-0’ב48-1-0-0’）ב4-0-0-0’BC1群体构建的分子遗传图谱含11个连锁群,100个SSR标记;遗传总距离覆盖856.8 cM,平均遗传距离为8.57cM,每个连锁群平均长度为77.8 cM;普通丝瓜果实苦味相关基因Lcbt被定位在LG5上,与其最近的SSR标记为SGJ789,遗传距离为6.3 cM。3、利用生物信息学分析将SGC196与SGE292锚定到黄瓜1号染色体上,在其区间内继续设计20对引物,其中8对表现多态。进一步局部作图成功将有棱丝瓜果实苦味基因Labt定位于标记LuBt1-2和LuBt1A之间,遗传距离分别为1.9 cM和1.2 cM。这两标记可用于分子标记辅助选择育种。4、将Lubt1-2、Lubt1A锚定到黄瓜1号染色体上,两标记区间内发现黄瓜果实苦味相关基因Csa1G044,推测该基因可能与Labt为同源基因。根据黄瓜与西瓜基因组间的序列保守区段设计引物LaBt,成功克隆了有棱丝瓜果实苦味基因Labt,对其进行了测序分析,发现该基因在两亲本材料中存在一个碱基的缺失/插入,可能导致普通丝瓜中该基因翻译提前终止而造成功能丧失。