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目的:1.分析在滋肾育胎丸影响下,肾虚-薄型子宫内膜不孕患者其月经量、子宫内膜厚度、中医症候的变化,探索中医药对薄型子宫内膜的治疗。分析在滋肾育胎丸影响下miR-135a、miR-196b对子宫内膜HOXA10及其下游基因整合素β 3、EMX2基因的调控作用,以期阐明滋肾育胎丸治疗薄型子宫内膜的靶点及药效机制,补充滋肾育胎丸的临床适用范围。方法:1.临床实验:选择90例肾虚型-薄型子宫内膜患者,采用随机数字方法分为滋肾育胎丸组,戊酸雌二醇组,戊酸雌二醇+滋肾育胎丸组30例。戊酸雌二醇组于月经第5日起予戊酸雌二醇2mg,日1次,连续10d;滋肾育胎丸组自月经第5天开始予滋肾育胎丸,口服,淡盐水或蜂蜜水送服。一次5克(约三分之二瓶盖),一日3次。服用至月经来潮停药;戊酸雌二醇+滋肾育胎丸组予戊酸雌二醇+滋肾育胎丸加减,用量用法同前。三组皆以3个月为1疗程,观察三组临床症状积分变化,月经量变化,子宫内膜厚度,妊娠率评估。2.动物实验:将28只雌性SD大鼠随机分为4组,分别为大鼠空白组,肾虚—薄型子宫内膜大鼠空白组,肾虚—薄型子宫内膜大鼠阿斯匹林组,肾虚—薄型子宫内膜大鼠滋肾育胎丸组。予药物干预后,应用qRT-PCR检测技术,检测大鼠子宫内膜miR-135a、miR-196b、HOXA10基因、ITGβ 3基因、EMX2基因的表达变化。结果:1.中医症候积分比较,治疗前三组中医症候积分比较无显著性差异(P=0.635>0.05),治疗后有显著性差异(P=0.000<0.01),三组间治疗前后积分差值有显著性差异(P=0.000<0.001)组内自身治疗前后积分比较均有显著差异(P=0.000<0.01)。2.中医症候综合疗效:90例病例中,西药组总有效率为6.67%,中西医组总有效率100%,中医组总有效率70%。3.月经改善情况:三组病例治疗前后月经量积分比较有显著差异(t=-6.407,P=0.000<0.01)。4.子宫内膜厚度的改善:三组病例治疗后子宫内膜厚度均较治疗前明显增厚。5.造模组子宫内膜EMX2基因表达较空白模型组、阿司匹林组、滋肾育胎丸组均增高(P<0.05),而滋肾育胎丸组子宫内膜EMX2基因表达较其余各组低(P<0.05)。6.造模组整合素β 3基因表达较空白对照组、滋肾育胎丸组低(P<0.05),滋肾育胎丸组整合素β 3表达较造模组、阿司匹林组表达高(P<0.05)。7.滋肾育胎丸组的HOXA10基因相对表达量较空白模型组、阿司匹林组、造模组明显偏高(P<0.05),其中造模组的HOXA10基因相对表达量最低(P<0.05)。8.与造模组比较,空白对照组,阿司匹林组,滋肾育胎丸组的miR-135a相对表达量均较造模组低,其中,滋肾育胎丸高剂量组的最低(P<0.05)。9.与造模组比较,其余各组的miR-196b相对表达量均较造模组低(P<0.05)。10.HOXA10基因与EMX2基因表达显著负相关(r=-0.683,P<0.01);HOXA10基因与ITGβ 3基因表达显著正相关(r=0.714,P<0.01)。11.miR-135a 与 HOXA10 基因负相关性(r=-0.683,P<0.01);miR-135a 和 EMX2基因表达高度正相关(r=0.886,P<0.01);miR-135a和ITGβ 3基因表达呈现显著负相关(r=-0.722,P<0.01)。12.miR-196b 与 HOXA10 基因表达呈显著负相关(r=-0.736,P<0.01);miR-196b 与 EMX2基因表达显著相关(r=0.778,P<0.01);miR-196b 和 ITGβ 3 基因表达呈现负负相关(r=-0.778,P<0.01)。结论:1、本研究临床观察结果显示滋肾育胎丸联合雌激素能有效改善肾虚-薄型子宫不孕患者的子宫内膜厚度,月经量,中医临床症状等,其效果优于单纯使用雌激素治疗。提示滋肾育胎丸通过补肾,对肾虚-薄型子宫不孕患者有治疗作用。2、本研究动物实验结果显示滋肾育胎丸能增强大鼠子宫内膜ITGβ 3、HOXA10基因的表达;其对EMX2、miR-135a、miR-196b基因抑制作用优于阿司匹林组、雌激素组。提示滋肾育胎丸治疗肾虚-薄型子宫内膜大鼠,其可能通过下调miR-135a,miR-196b,上调HOXA10基因的表达,从而调节靶基因EMX2、ITGβ3,以此改善肾虚-薄型子宫内膜大鼠的子宫内膜容受性。