紫菜对大鼠生理机能的影响及对大鼠铅中毒的促排作用研究

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紫菜是海洋藻类中的佼佼者,在我国黄海、渤海等海域均有分布,产量居世界第一。紫菜含有丰富的营养成分和活性物质,包括优质蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、多种维生素、微量元素、活性多糖、膳食纤维等。已有研究发现紫菜具有抗突变、抗肿瘤、增强免疫功能、抗衰老、降血脂等作用。但是紫菜因富含多糖、蛋白质和脂肪等成分,以及氨基、羧基、磷酸根、醛基、糖醛酸、羟基、硫酸根等活性基团,带有大量负电荷和较大的表面积,对于水域中的铅具有较强的富集作用。2011年7月,第35届国际食品法典委员会(CAC, CodexAlimentariusCommission)确定制定CAC亚洲区域紫菜标准,紫菜自身的质量安全问题引起了政府、企事业单位、养殖户、消费者等社会各界的高度重视。此外,众多学者利用紫菜的成分组成和结构特点来对重金属等外源性物质吸附作用进行研究,研究发现活体紫菜和非活体紫菜均具有较好的吸附效果。吸附机制主要为离子交换、络合、氧化还原和微沉淀等。但是关于非活性藻类在生物体内对重金属的吸附作用尚无相关报道,还需进行进一步的研究。本研究从紫菜自身出发,首先探讨了条斑紫菜和坛紫菜对大鼠肝脏、肾脏、抗氧化系统等生理机能的影响;其次,在非活体紫菜对铅的体外吸附作用相关研究的基础上,探讨了非活体紫菜对生物体内铅的促排作用。为进一步评价紫菜的食用安全性提供实验依据,也为紫菜中铅限量的制定提供数据支撑。本研究选用Wistar大鼠,随机分成7组,每组14只,以灌胃的方式喂食不同种类和不同剂量的紫菜,分组如下:A组为空白对照组;B组为条斑紫菜高剂量组(500mg/kg.bw.d);C组为条斑紫菜中剂量组(300mg/kg.bw.d);D组为条斑紫菜低剂量组(100mg/kg.bw.d);E组为坛紫菜高剂量组(500mg/kg.bw.d);F组为坛紫菜中剂量组(300mg/kg.bw.d);G组为坛紫菜低剂量(100mg/kg.bw.d)。实验持续30天,在实验第15天随机抽取6只大鼠处死,第30天处死剩余大鼠。分别留取大鼠腹主动脉血、大鼠的肝脏、肾脏、粪便等组织和器官。每周称重,并记录实验期间大鼠的外观体征、行为活动、饮食、健康状况和中毒症状等。用电感耦合等离子体发射光谱法测定血样与组织样品中Pb的含量,用试剂盒法测定抗氧化指标血清丙二醛(MDA)、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以及用全自动生化分析仪测定血清总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)等肝脏功能指示性指标;尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等生化指标,探讨紫菜对大鼠生理机能的影响。本研究第二部分中以灌胃方式给Wistar大鼠同时喂食紫菜和铅溶液,探讨紫菜对铅中毒大鼠体内铅的促排作用。实验分为8组,每组14只,A组为空白对照组;B组为铅对照组(5mg/kg.bw.d铅溶液);C组为条斑紫菜高剂量组(500mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液);D组为条斑紫菜中剂量组(300mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液);E组为条斑紫菜低剂量组(100mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液);F组为坛紫菜高剂量组(500mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液);G组为坛紫菜中剂量组(300mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液);H组为坛紫菜低剂量组(100mg/kg.bw.d紫菜+5mg/kg.bw.d铅溶液)。实验持续30天,在实验第15天随机抽取6只大鼠处死,第30天处死剩余大鼠。测定指标及方法同上述实验,为了解紫菜对染铅大鼠体内铅的促排效果,以及紫菜对铅致大鼠的肝脏、肾脏及抗氧化系统损伤的缓解和抑制作用。实验结果表明,条斑紫菜和坛紫菜能够维持和增强大鼠正常的生理机能,促进大鼠生长作用,增强抗氧化系统的功能的作用,其中坛紫菜高剂量组和坛紫菜中剂量组效果尤为突出。促排实验结果表明,紫菜对肝脏具有保护作用,对低剂量短时铅暴露具有较好促排作用。条斑紫菜和坛紫菜在一定程度上能够降低肝脏中铅蓄积的作用,对于低剂量短时间(14d内)铅接触具有较为明显的促排效果,且条斑紫菜优于坛紫菜,条斑紫菜低剂量组效果尤为突出;这两种紫菜均具有降低ALP、AST、ALT以及ALT/AST的含量或活性。综合各生化指标,各紫菜剂量组中,坛紫菜高剂量组效果最好。条斑紫菜和坛紫菜均能够明显降低肾脏铅含量,加强机体对铅的代谢,促进铅的排出。综合肝脏铅含量、肾脏铅含量、血液铅含量和粪便中铅含量数据,低剂量组的紫菜(条斑紫菜和坛紫菜)对染毒时间较短的大鼠肾铅的促排效果明显,对长时间染毒大鼠的剂量效果欠佳;高剂量组和中剂量组的紫菜(条斑紫菜和坛紫菜)对染毒时间较长的大鼠的肾铅促排效果较好。对于肾铅的促排,低剂量的条斑紫菜和低剂量的坛紫菜有很好的效果,且条斑紫菜随着紫菜量的增加促排效果增强。
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