穿心莲内酯对小鼠腹腔巨噬细胞MMP-2,MMP-9表达和活性的影响

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目的:观察穿心莲的一种主要有效成分穿心莲内酯(API)对小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2 ,MMP-9)的活性及mRNA表达的影响,探讨穿心莲内酯是否具有抑制巨噬细胞MMP-2和MMP-9活性及mRNA表达的作用。方法:用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用终浓度为100μg/ml的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞复制泡沫细胞模型,同时分别以不同浓度的穿心莲内酯对巨噬细胞进行干预。将收集到的巨噬细胞进行如下分组A:空白对照组;B:ox-LDL组;C:ox-LDL+ API 50μg/ml组;D:ox-LDL+API 100μg/ml组;E:ox-LDL+API 200μg/ml组,培养24小时后,进行相关检测。采用免疫荧光方法,明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和穿心莲内酯对巨噬细胞MMP-2,MMP-9活性和表达的影响。结果:与对照组相比,ox-LDL组的MMP-2和MMP-9的活性和mRNA表达显著升高(P<0.01),加入穿心莲内酯50μg/ml组的MMP-2和MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05),而加入穿心莲内酯100,200μg/ml组的MMP-2和MMP-9的活性和其mRNA表达均有不同程度的下降,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果显示与对照组相比,ox-LDL损伤组的荧光强度明显增强,ox-LDL+API 100μg/ml组,其荧光强度较之损伤组有较明显的减弱。结论:中等及以上浓度的穿心莲内酯能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2和MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险地作用。
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