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目的:髋关节周围骨折包括股骨颈和股骨转子间骨折。老年人身体机能减退,肢体肌力差,骨质疏松,更容易在低能量损害下发生髋关节周围骨折,是一种高致残性疾病。患者在发生髋关节周围骨折后由于骨折断端出血、炎性因子释放以及伤侧肢体制动、机体内各种物质代谢增强等各种因素使患者机体处于高凝状态。本研究通过对比髋关节周围骨折患者、非骨折人群外周血中不同类型的微粒(microparticles,MPs)水平及其对凝血酶生成时间(activated clotting time,ACT)的影响、对经典凝血功能的影响,初步探讨MPs在髋关节周围骨折患者高凝状态中的作用机制;并应用MPs清除蛋白对比清除MPs前后ACT的差异,尝试为髋关节周围骨折患者高凝状态的治疗新思路提供一定的理论依据。方法:(1)收集2018年12月至2019年9月我院骨科急诊收治符合纳入标准的髋关节周围骨折患者为实验组,采集伤后48小时内,清晨空腹前臂浅静脉血样2ml。同时,在健康体检中心收集符合纳入标准的非骨折人群作为对照组,采集其清晨空腹前臂浅静脉血样2ml;(2)应用纳米颗粒跟踪分析仪和透射电子显微镜对各研究对象外周血样中提纯的MPs进行形态学观察;(3)应用流式细胞仪测定其中各研究对象外周血样中表达磷酯酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)的MPs及来源于血小板的微粒(Platelet-drived microparticles,PMPs)水平;(4)应用凝血和血小板功能分析仪测定髋关节周围骨折患者和对照组的外周血样中的ACT水平,以及测定在体外利用乳凝集素(Lactadherin)蛋白清除MPs后外周血样中ACT前后的差异;(5)应用全自动凝血分析仪测定各样本无细胞血浆(cell free plasma,CFP)在过滤去除MPs前后的凝血功能;结果:(1)透射电镜下观察MPs形态呈现囊泡状,具有完整的双层膜结构,大小在100-1000nm范围内,形态不均一。纳米粒径跟踪分析仪可以看到髋关节周围骨折组外周静脉血样中MPs大小为(245.4±3.6)nm;对照组外周静脉血样MPs大小为(236.5±2.7)nm,MPs直径大小两组之间无统计学差异(P>0.05)。(2)髋关节周围骨折组外周静脉血样中AV~+MPs计数:(564.3±171.0)/ul,PMPs:(326.0±103.8)/ul,对照组外周静脉血样中AV~+MPs计数:(251.9±81.5)/ul,PMPs:(192.1±40.6)/ul,两组之间的存在统计学差异(P<0.001);髋关节周围骨折组外周静脉血样ACT值:(323.8±93.9)s,对照组外周静脉血样ACT值:(535.5±76.2)s,二组之间存在统计学差异(P<0.001)。(3)根据Shapiro-Wilk检验符合正态分布,并且不存在异常值。髋关节周围骨折组外周静脉血样中AV~+MPs计数与ACT值之间存在线性关系,采用Pearson相关性分析发现AV~+MPs计数与ACT值间存在高度负相关(r=-0.827,P<0.001)。而PMPs计数与ACT值之间不存在线性关系,二者之间没有明显的相关性(P>0.05)。(4)CFP测定凝血功能的结果为PT:(10.8±0.46)s、APTT:(30.6±1.56)s、Fib:(3.08±0.36)g/L、INR:(0.98±0.04)、TT:(19.3±0.62)s;而CFP滤除MPs后凝血四项PT:(10.8±0.52)s、APTT:(32.4±3.0)s、Fib:(2.90±0.33)g/L、INR:(0.99±0.05)s、TT:(19.9±0.63)s。凝血功能前后无统计学差异(P>0.05)。(5)髋周围骨折患者外周静脉血样中ACT值:(340.4±38.51)s,加入Lactadherin蛋白的蛋白组ACT值:(898.4±35.7)s,加入PBS的阴性对照组ACT值:(331.1±41.19)s,三组之间ACT值差异具有统计学差异(F=1001.41,p<0.001),其中,ACT值在骨折组与蛋白组,阴性对照组与蛋白组之间具有统计学差异(p<0.001),ACT值在骨折组与阴性对照组之间无统计学差异(p>0.05)。结论:髋关节周围骨折组外周静脉血样中AV~+MPs及PMPs含量较对照组明显升高,且AV~+MPs计数与患者的高凝状态具有高度相关性;MPs对经典的凝血功能无明显影响;在体外Lactadherin蛋白具有清除MPs纠正血液高凝状态的作用。