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【目的】使用不同浓度的1,25二羟基维生素D3（1,25-（OH）2D3，活性维生素D3），分别处理处于对数生长期的雌激素受体（ER）不同状态的人乳腺癌细胞系MCF-7（ER+）、MDA-MB-453(ER-)，于不同时间点检测两种乳腺癌细胞中Ki67、Her-2的mRNA及蛋白表达情况，与经三苯氧胺（TAM）处理的阳性对照组进行比较,分析1,25-（OH）2D3对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-453中Ki67及Her-2的表达的影响，并比较其分子通路与雌激素受体通路的关联性。【方法】传代培养ER状态不同而维生素D受体（VDR）均为阳性的乳腺癌细胞系MCF-7（ER+/VDR+）、MDA-MB-453（ER-/VDR+），用不同浓度1,25-(OH)2D（31×10-9mol/L、1×10-8mol/L、1×10-7mol/L）处理对数生长期的乳腺癌细胞，同时用三苯氧胺（TAM）分别处理这两种细胞作为阳性对照，分别于24h、48h、72h三个时间点收集细胞，采用Real-time RT-PCR法检测Ki67、Her-2的mRNA相对含量，WesternBlot检测其蛋白的表达。【结果】1．用1,25-(OH)2D3处理MCF-7、MDA-MB-453细胞后，可减少其Ki67及Her-2的表达，且随着药物浓度的增加和作用时间的延长Ki67及Her-2的表达越少，差异具有统计学意义（P＜0.05），表明1,25-(OH)2D3对这两种乳腺癌细胞中Ki67及Her-2表达有抑制作用。2．1,25-(OH)2D3对MCF-7细胞中Ki67及Her-2表达的抑制作用较MDA-MB-453细胞强，其差异具有统计学意义（P＜0.05）。3．与TAM组相比，1,25-(OH)2D3对MDA-MB-453细胞中Ki67及Her-2表达的抑制作用较强，两组相比其差异具有统计学意义（P＜0.05）；而对MCF-7细胞，两组无明显差异。表明对ER阴性的乳腺癌细胞MDA-MB-453，1,25-(OH)2D3的作用强于TAM。4．用1,25-(OH)2D3处理乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-453后，Ki67与Her-2在两种细胞中的表达均减少，且两者变化呈正相关。在MCF-7乳腺癌细胞中，（r＝0.875,P=0.00＜0.01）；在MDA-MB-453细胞中，（r＝0.855,P=0.00＜0.01）。【结论】1．1,25-(OH)2D3可减少MCF-7、MDA-MB-453细胞中Ki67及Her-2的表达，且呈量-效关系和时-效关系；对MCF-7细胞作用强于MDA-MB-453细胞。2．1,25-(OH)2D3作用于乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-453后，细胞中Ki67与Her-2两者的表达呈正相关。