天然来源的多糖因具有生物相容性、结构易修饰性、低毒性、生物可降解性和双重调解性而受到广泛关注。玛咖（Lepidium meyenii.Walp,西班牙名:maca）原产地是秘鲁,后引入国内并在云南大量种植,是云南省药食两用的天然药材,玛咖多糖（Maca Polysaccharide）是其主要成分之一,目前的研究主要是对丽江玛咖的提取方法、多糖组成及体外生理活性进行研究,缺乏玛咖多糖具体的结构和体内生理活性,限制了玛咖的应用。因此,本文以丽江黑玛咖为原料,研究了玛咖多糖提取、分离纯化及结构鉴定,通过对玛咖多糖阳离子化修饰增强其免疫活性,最后将两种多糖与阿霉素（Dox）联用,研究了其协同抗肿瘤活性的机制,具体研究内容如下:首先,从丽江黑玛咖中提取得玛咖粗多糖,经过除色素、脱蛋白、DEAE纤维素柱层析以及葡聚糖凝胶柱层析等方法对玛咖粗多糖进行了纯化,从中得到一种中性玛咖多糖即MPW。通过HPGPC进行分子量鉴定,得到MPW的分子量为8-9k Da,通过单糖组成、摩尔比分析和甲基化分析得出,MPW主要由葡萄糖组成,含有三种糖苷键连接,分别是:D-Glcp（1→、→4）-D-Glcp–（1→、→4,6）-D-Glcp（1→,摩尔比为0.050:0.875:0.075,经过红外、一维和二维NMR结构解析得知,该多糖的主链连接方式为→4）-α-D-Glcp-(1→的糖苷键,而端基α-D-Glcp-(1→通过O-6键连接在主链上,因此,MPW是一个分子量集中、结构均一、纯度较高的多糖化合物。其次,通过将MPW与乙二胺反应进行阳离子化结构修饰（C-MPW）,对MPW、乙二胺和缩合剂的用量进行了实验设计,以取代度和电位作为评价指标,最终选择取代度最大（53.37%）电位为+17.92 m V的实验方案,即CDI与MPW的质量比为1:2,乙二胺与CDI的摩尔比为2:1,进行后续的实验。再次,通过将MPW与C-MPW联合化疗药阿霉素（Dox）进行4T1荷瘤小鼠抗肿瘤研究,发现MPW/C-MPW联用Dox给药后,小鼠体重呈“先下降再上升”趋势,而Dox组小鼠的体重在实验过程中立即下降,在实验结束时,Dox组小鼠的体重低于两个多糖组小鼠的体重,表明MPW/C-MPW联用Dox给药后,可显著改善化疗药物引起的免疫抑制作用;其中Dox单独使用时,肿瘤抑制率（TSR）达到60%,但经过和两种多糖联用时,TSR能达到80%;在治疗结束后,分别对肿瘤组织和肺组织进行H&E染色,结果表明MPW和C-MPW不仅具有良好的抑瘤活性,还可以抑制肿瘤向肺转移,且MPW经过阳离子化修饰后具有更强的抗肿瘤效果。最后,研究了MPW与C-MPW联合Dox治疗4T1荷瘤小鼠后对肿瘤微环境调控作用机制,通过免疫荧光染色和流式定量分析了TAMs的极化情况,两个多糖组在TAMs中CD206的表达减少,CCR7的表达增多,表明TAMs从M2逆转为M1;通过免疫组化、ELISA和WB检查了M1和M2产生的分泌细胞因子水平,验证了MPW和C-MPW可结合并作用于M2型巨噬细胞表面的Toll样受体（TLR2、TLR4）以及甘露糖受体（MR）等模式识别受体（PRR）,激活下游的NF-κB和Jun等相关信号通路,从而上调TNF-α,IL-6以及i NOs等炎症因子的分泌,以定向诱导M2型TAMs转变为M1型,且与MPW相比,C-MPW与TLR4的结合能力更强,表现出更强的极化作用。以上的研究表明,MPW是一种新结构的中性玛咖多糖,其对肿瘤具有免疫调节活性以及抗肿瘤活性,这种抗肿瘤作用通过阳离子改性得到进一步加强,这些研究为玛咖多糖的广泛应用奠定了基础。