人参是我国重要的药食两用资源,含有人参皂苷、多糖、维生素及挥发油等活性成分。其中,人参多糖具有免疫调节、抗肿瘤和抗氧化等生物活性,被认为是仅次于人参皂苷的重要活性成分。近年来,多种大分子量的果胶类人参多糖相继被纯化和鉴定,但低分子量的人参多糖却鲜有报道。本文首先采用热水浸提、乙醇沉淀的方法提取人参粗多糖,然后经α-淀粉酶水解、木瓜蛋白酶水解和多种层析纯化技术分离得到了人参中的一种低分子量中性多糖,再利用化学分析和仪器分析方法对该低分子量中性人参多糖的理化性质和分子结构进行了系统研究。研究结果如下:(1)采用热水提取、乙醇沉淀的方法提取得到了人参粗多糖,提取率为9.32%,粗提物中多糖含量为53.14±1.59%,蛋白质含量为1.53±0.04%,淀粉含量为9.18±0.13%(w/w)。依次采用α-淀粉酶和木瓜蛋白酶水解粗多糖后,其淀粉完全被去除,蛋白质含量降至0.5%以下。最后经DEAE-纤维素离子交换层析柱和G-100葡聚糖凝胶层析柱纯化,得到人参多糖纯化组分GP1A,其收率为7.28%。(2)采用紫外光谱法、凝胶渗透色谱法、扫描电镜、X-射线衍射以及红外光谱法对GP1A的理化性质进行分析测定。结果表明,GP1A不含核酸和蛋白杂质;分子量分布均匀,平均分子量为1.025kDa;GP1A具有典型的多糖蜂窝状微观结构,其结晶度较低,属于无定形多糖;含有多糖典型的特征官能团,以α-型吡喃糖苷键为主,不含糖醛酸,属于中性多糖。(3)分别采用气相色谱质谱联用法和气相色谱法对GP1A的三氟乙酸降解、硅烷化衍生修饰产物进行定性与定量分析,确定GP1A主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖和阿拉伯糖等五种单糖组成,其摩尔比为90.62:2.01:7.14:1.05:0.20。借助于一维核磁共振氢谱和碳谱,二维核磁包括共振异核位移相关谱、同核位移相关谱和长程异核位移相关谱进一步分析了人参多糖GP1A的初级结构。GP1A的氢谱图显示异头质子的化学位移信号在δ 4.5-5.4 ppm范围内,表明GP1A含有α-型和β-型两类糖苷键。GP1A碳谱信号在δ 60-85 ppm的范围内较集中,可以判断该多糖结构为吡喃环结构。氢谱上出现的5个异头质子信号δ5.31 ppm、δ 5.14 ppm、δ 4.88 ppm、δ 4.58 ppm和δ 4.56ppm分别对应碳谱上的异头碳信号δ99.60ppm、δ 100.38 ppm、δ 98.25 ppm、δ 95.76 ppm和δ 95.75 ppm,结合气相色谱-质谱和气相分析可知,该5个峰分别为α-D-吡喃葡萄糖、α-D-吡喃半乳糖、β-D-吡喃木糖、β-D-吡喃甘露糖和β-D-吡喃阿拉伯糖端基信号。通过对各单糖氢和碳化学位移进行归属,得到了如下的糖苷键片段:综上,本研究通过热水提取、乙醇沉淀法制备得到了人参粗多糖,然后通过酶解法去除淀粉和蛋白质,进而通过层析方法纯化得到了一种低分子量的非淀粉类中性人参多糖,并对其理化性质和分子结构进行了系统分析。本研究填补了目前人参多糖研究中缺少低分子量人参多糖的不足,为系统和全面了解人参多糖的组成和结构特征提供了新的信息。