BMP9对人肺腺癌细胞A549侵袭、迁移的影响及机制的研究

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目的探讨骨形态发生蛋白9对人肺腺癌细胞A549侵袭、迁移的影响及可能机制。方法采用免疫组织化学方法检测BMP9和IL6蛋白在临床肺腺癌及其癌旁组织中的表达情况,以人肺腺癌细胞A549作为研究对象,用腺病毒BMP9感染A549细胞制备AdBMP9/A549细胞,把此组当成实验组。,用GFP腺病毒感染A549细胞,制备AdGFP/A549细胞,把这一组作为实验的对照组;把A549细胞未经腺病毒感染,作为空白对照组。实验采用逆转录PCR检测三组细胞BMP9mRNA的表达,同时采用Western blot检测三组细胞中BMP9蛋白的表达情况。通过细胞划痕实验﹑Transwell侵袭实验检测三组细胞迁移及侵袭的改变是否有差异,RT-PCR及Western blot检测被腺病毒BMP9感染后,IL6的mRNA和蛋白表达情况;同时用Western blot技术检测PI3K/Akt信号通路中总Akt和磷酸化Akt蛋白表达。结果与癌旁组织相比,BMP9与IL6蛋白高表达于肺腺癌组织。具有统计学意义(p<0.05)。A549细胞感染BMP9腺病毒后,AdBMP9/A549组的BMP9mRNA和蛋白的表达高于AdGFP/A549组和A549组。AdBMP9/A549组的划痕愈合率为(97.4±2.6)%,AdGFP/A549的划痕愈合率为(85.4±2.1)%。A549组的划痕愈合率为(.5±3.4)%(P<0.05);AdBMP9/A549组的穿膜细胞数为(224.3±24.6)个,AdGFP/A549组的穿膜细胞数为(115.5±13.1),A549组的穿膜细胞数为(123.3±14.9),AdBMP9/A549组的细胞穿膜数高于AdGFP/A549与A549组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组细胞相比,IL6mRNA和蛋白的表达在AdBMP9/A549组要高于AdGFP/A549组和A549组。磷酸化的Akt蛋白的表达也是上调的。结论在肺腺癌组织中BMP9和IL6蛋白的表达高于癌旁组织。体外细胞实验发现BMP9可能通过上调IL6的表达,促进人肺腺癌A549细胞侵袭、迁移,并且可能与PI3K/Akt信号通路有关。
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