番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)又称西红柿,为茄科(Solanaceae)一年生草本植物。由于其果实营养丰富,鲜美多汁、适应性强、产量高、用途广泛,因而现已成为我国一种重要蔬菜作物,而且是生物学研究最多的模式植物之一。但由于在栽培过程中番茄很容易受多种病虫害、干旱、寒冷等影响,致使种质严重退化、产量降低、品质变劣和抗性降低等。因此,如何改善番茄品质及提高其综合抗性已成为人们关注的焦点。近年来快速发展的生物技术为番茄品种遗传改良提供了新途径。 本研究以番茄常规品种CY-1、CY-2为试验材料,比较系统地研究了影响番茄离体再生的诸多因素,如外植体的培养条件、外植体类型、外源激素种类及组合、外植体生理状态等,建立了番茄子叶高效离体再生体系,从而为番茄的遗传转化研究与应用奠定了基础。试验结果表明:浸泡、暗培养能获得较整齐一致的子叶;不同激素组合及配比对番茄子叶不定芽再生有不同的影响,6-BA对不定芽的再生效果明显优于Zt,CY-1、CY-2子叶在MS+2.0mg/L 6-BA+0.02mg/LIAA的选择性培养基上不定芽再生频率可达95%以上,平均每子叶再生芽数达4个;同一基因型的番茄子叶再生效果比下胚轴好,而其中又以9d左右叶龄的子叶再生能力最高,不定芽在MS+0.1mg/L BA+0.3mg/L IAA生根培养基中,生根率达75%。 COI1基因是一个茉莉素调控基因,其调控植物育性和抗性。为了证明COI1基因介导的茉莉素信号途径在植物界的保守性并利用COI1的同源基因。我们从番茄ESTs中分离出与COI1基因高度重复的部分片段,然后以扩增产物作为探针从番茄cDNA文库筛选出番茄COI1同源基因(tCOI1)基因的全长序列。将tCOI1基因的全长序列插入到植物表达载体pROK2中,然后再将该载体转入农杆菌AGL-1中,构建了COI1同源基因的表达载体。通过农杆菌介导法转化番