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早产(preterm birth,PTB)是指妊娠周期小于37周,经常伴随着体重小于2500g的低体重婴儿娩出(low birth weight),是新生儿死亡的主要原因,为社会和家庭带来沉重负担。生殖道或生殖系统以外的感染是早产低体重儿娩出的主要原因。流行病学研究表明,作为一种常见的慢性感染性口腔疾病——牙周病,是早产低体重儿的危险因素之一。越来越多的研究表明,牙周病的主要致病菌之一—牙龈卟啉单胞菌,可以在娩出早产低体重儿的孕妇的胎盘、羊水、血管内皮细胞中检测到。因而,认为牙龈卟啉单胞菌与早产低体重儿的娩出有关。虽然关于牙周致病菌如何诱导早产低体重儿娩出的机制尚不完全清楚,但是大量研究提示,牙周致病菌可以通过诱导母胎界面细胞发生凋亡和分泌炎症因子从而促使早产低体重儿的娩出。故此,本研究拟通过构建体牙龈叶啉单胞菌与人胚胎滋养层细胞共培养的体外模型,来探讨牙龈卟啉单胞菌诱导早产低体重儿娩出的机制,从而为牙周病是早产低体重儿的危险因素提供科学依据。目的:探讨牙龈卟啉单胞菌对人胚胎滋养层细胞的影响及PI3K-Akt信号通路在此过程中的作用。方法:牙龈卟啉单胞菌 ATCC33277(Porphyromonas gingival is,P.gingvalis)以不同的感染复数(MOIs)与人胚胎滋养层细胞(HTR-8)共培养,采用LY294002失活PI3K;选择倒置显微镜和共聚焦显微镜记录人胚胎滋养层细胞的形态变化;采用流式细胞术检测感染后人胚胎滋养层细胞凋亡的情况;采用Western Blot检测目的蛋白表达情况;采用ELISA技术检测目的炎症因子分泌情况。结果:牙龈卟啉单胞菌与人胚胎滋养层细胞共培养24h、48h后,感染组细胞凋亡率明显增高,且细胞凋亡率存在时间和剂量依赖性。感染6h、12h时,与未感染组相比,感染组细胞分泌的IL-8和IFN-Y的分泌明显增高且存在剂量依赖性。同时,在此过程,p-Akt蛋白表达升高。当用LY294002预先处理HTR-8细胞再与牙龈卟啉单胞菌共培养,LY294002处理组细胞凋亡率>35%,明显高于单纯感染牙龈卟啉单胞菌组(P<0.001),而DMSO处理组的细胞凋亡率与单纯刺激组相比无统计学差异(P>0.05);与单纯感染组相比,LY294002处理组细胞分泌的IL-8和IFN-γ明显增多,而DMS0处理组的细胞因子分泌量与单纯刺激组相比无统计学差异。结论:牙龈卟啉单胞菌能够诱导胚胎滋养层细胞发生凋亡和分泌炎症因子。在此过程中,PI3K-Akt信号通路被激活,当Akt活性被抑制后,细胞凋亡和分泌炎症因子增加。提示,牙周病促使早产低体重儿的娩出与牙龈卟啉单胞菌诱导胚胎滋养层细胞凋亡和分泌炎症因子有关。在此过程中,牙龈卟啉单胞菌激活的PI3K-Akt信号对凋亡和炎症有一定的抑制作用。