膜荚黄芪作为常见药材在临床上有着非常广泛的应用,异黄酮是其主要的活性成分之一,但是其分子生物合成机制尚不清晰。在苯丙烷代谢途径中,查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)是催化异黄酮类化合物合成的关键酶。本文以膜荚黄芪为材料,克隆CHI基因,并对其进行了序列分析,探究了其在不同器官和环境胁迫下的表达特性,为CHI基因在膜荚黄芪黄酮类生物合成中所起的作用提供一定的理论依据。结果表明,膜荚黄芪CHI基因(AmCHI)cDNA全长为910 bp(Genbank登陆号为KY0862871),开放阅读框为660 bp,编码219个氨基酸,其分子量为24021.42 Da,等电点为5.41。AmCHI蛋白定位于细胞质,无信号肽,属于稳定的亲水蛋白,氨基酸序列与豆科植物相似性较高,推测属于TypeⅡ型。实时荧光定量PCR分析结果表明,AmCHI的组成型表达与诱导表达均与异黄酮含量呈正相关,因此AmCHI在黄芪异黄酮生物合成中起着重要的作用。