两种牙周组织工程支架体内异位成骨能力的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linxunchang
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目的本实验通过对壳聚糖-丝素蛋白(chitosan-silk fibroinCS-SF)支架与壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙(chitosan-silk fibroin-tricalcium CS-SF-TCP)支架的基本性能、力学性能及异位成骨能力进行研究,寻求更适合牙周组织工程的支架。方法采用二次冻干技术制备两种支架,液体替代法、冰冻切片、INSTRON5544拉伸实验机对其一般性能及力学性能进行检测、全髓贴壁法培养骨髓基质细胞(BMSCs)。将裸鼠24只、雄性、体重20~25g,采用完全随机法分为4组,每组6只,CS-SF组、CS-SF+BMSCs组、CS-SF-TCP组、CS-SF-TCP+BMSCs组,所有的植入物均植入裸鼠背部皮下。每只裸鼠背部植入3块。每组分别于术后4、8周各处死动物3只。通过大体观察、组织学与Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察两种支架的成骨能力。结果1、支架的一般性能及力学性能的观察CS-SF与CS-SF-TCP支架大体外观呈白色疏松多孔海绵样物质,有一定的弹性与脆性。两种支架的孔隙率约为70%-80%,孔径值为100-200μm。置于无水乙醇中有溶胀现象但未发生溶解。冰冻切片观察支架的内部结构,可见支架孔径较均匀且彼此相连。力学性能的结果显示:CS-SF支架的压缩强度为0.44±0.15MPa,CS-SF-TCP支架的压缩强度为1.44±0.96MPa。2、大体及组织学结果所有的植入物均被一层致密的纤维薄膜包绕,并发生肉眼可见的吸收现象,触之稍硬。组织学染色显示:4周时,CS-SF组与CS-SF-TCP组仅见支架的边缘有纤维膜包绕,支架发生吸收断裂,支架的中心并未见细胞的长入及胶原样物质生成。CS-SF+BMSCs组与CS-SF-TCP+BMSCs组支架的边缘有纤维膜包绕,支架的中心可见细胞及胶原样物质生成。8周时,CS-SF组与CS-SF-TCP组支架的吸收更明显,仍未见细胞长入。CS-SF+BMSCs组与CS-SF-TCP+BMSCs组可见细胞样物质增多,胶原样物质增多增粗。所有组均未见有明显的骨及类骨质样物质生成。3、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色所有组4、8周时均可见Ⅰ型胶原阳性表达,CS-SF组与CS-SF-TCP组阳性表达主要在支架的边缘,CS-SF+BMSCs组与CS-SF-TCP+BMSCs组阳性表达主要在支架的孔隙表面及中央。4、8周时CS-SF-TCP+BMSCs的平均光密度值均高于CS-SF+BMSCs组,差别有统计学意义(P<0.05)。CS-SF组的平均光密度值最低,与其他组差别有统计学意义(P<0.05)。结论CS-SF-TCP支架能更好的诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化的能力,故更适合于牙周组织工程。
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