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目的:本课题探讨p53基因突变对电离辐射诱导自噬的影响,研究NF-κB与突变p53之间的关系,阐明在电离辐射作用下NF-κB通过乙酰化介导突变p53抑制自噬的机制。方法:分别用CCK8、流式细胞仪以及集落形成实验,检测不同剂量电离辐射对细胞存活率和凋亡的影响,Western blot检测各细胞自噬相关蛋白及NF-κB的表达;免疫荧光检测自噬流变化;分别使用p300干扰RNA或SN50处理肿瘤细胞后再进行照射,通过Western blot检测细胞中的p65/Ac-p65、LC3及p300的表达;使用结肠癌RKO(p53野生)和HT-29(p53突变)细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型并进行局部电离辐射处理,Western blot和免疫组化法检测不同p53基因背景移植瘤中的p65和LC3的表达;收集临床胶质瘤和结肠癌样本,对组织样本进行p53基因突变检测,Western blot及免疫组化法检测p65和LC3在样本中的表达。结果:经电离辐射处理后,CCK8、流式细胞仪以及集落形成实验结果显示U87细胞存活率降低,凋亡率增加,且具有明显的剂量时间依赖性,而U251细胞变化不明显;Western blot结果显示,U87和RKO细胞自噬水平很高,p65在细胞浆中的表达上调,而U251和HT-29细胞自噬水平较低,但p65入核水平上调;用SN50竞争性抑制p65核转位,或是抑制p300的表达,均可明显增加U251细胞的自噬水平及细胞凋亡率;干扰ATG5后再进行电离辐射处理,能抑制U87细胞自噬而增加凋亡率;裸鼠皮下移植瘤模型实验发现p53突变组移植瘤组织中自噬水平较低,而核内p65水平较高。在结肠癌与胶质瘤临床样本中,突变型p53基因的样本中核内p65水平较高,自噬水平较低。结论:在电离辐射作用下,突变p53通过NF-κB介导电离辐射对自噬的调控,其机制涉及到乙酰化过程。