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目的:本研究通过检测膜性肾病(Membranous Nephropathy,MN)患者肾组织磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 Receptor,PLA2R)及Ig G各亚型的表达情况,探讨二者在特发性膜性肾病(Idiopathic Membranous Nephropathy,IMN)与继发性膜性肾病(Secondary Membranous Nephropathy,SMN)鉴别诊断中的意义,以及肾组织中PLA2R的表达情况与患者治疗疗效的相关性。方法:选取2012-2015年日本冈山大学病院肾·免疫·内分泌·代谢内科住院,行肾穿刺活检确诊为MN的患者,并随访半年以上。纳入实验患者共42例,其中13例确诊为IMN,29例确诊为SMN。SMN患者中14例为狼疮性肾炎(Lupus Nephritis,LN),药物因素、感染相关、恶性肿瘤各为3例,除LN以外的其它自身免疫性疾病4例,移植物抗宿主病(GVHD)2例。记录所有研究对象的一般临床资料,包括性别、年龄等,以及生化指标如血清肌酐(Serum creatinine,Scr)、血清白蛋白(Albumin,Alb)、24h尿蛋白定量(24 hour Urinary protein,Up)等;选用日本JSN-CKDI(2008)公布的公式,计算肾小球滤过率(e GFR)。患者在超声引导下行肾穿刺活检术,将取得的肾组织分别进行光镜、电镜及免疫荧光检查,根据光镜下观察到的系膜细胞增生、毛细血管内皮细胞增生、节段硬化、肾小管间质损害、肾小球球性硬化等表现,采用半定量法记录:若存在该表现记为1,无记为0;电镜结果主要用于MN的Ehrenreich-Churg法进行分期;PLA2R的检测采用间接免疫荧光法,一抗为兔多克隆抗PLA2R抗体,二抗为Alexa Fluor 488标记的山羊多克隆抗兔Ig G抗体。Ig G各亚型采用直接免疫荧光法检测,分别为FITC标记的小鼠抗人免疫球蛋白Ig G1(Fc)、Ig G2(Fab)、Ig G3(F(ab’)2)和IgG4(p Fc)单克隆抗体。荧光显微镜下观察,结果均采用半定量法进行评分(强阳性:2,阳性:1,弱阳性:0.5,阴性:0)。并以免疫荧光评分结果分为PLA2R≥1及PLA2R<1两组,分析经6个月糖皮质激素和(或)免疫抑制剂治疗后,两组患者尿蛋白与肌酐比值(protein-creatinine ratio,Up/Ugcr)及e GFR变化的关系。结果:1.本研究入选的MN患者42例,其中IMN组患者13例,SMN组患者29例。SMN中LN占48.3%(14/29),除LN以外的其它自身免疫性疾病为13.8%(4/29),药物因素、感染相关及恶性肿瘤均为10.3%(3/29)以及GVHD患者6.9%(2/29)。2.SMN组患者的女性比例多于IMN组女性比例(10:3 vs 10:19,P<0.05),IMN组平均年龄高于SMN组(65.0±17.7 vs 51.7±18.0,P<0.05);而两组在BMI、Up、Alb、血清总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、e GFR、BP、糖皮质激素使用率、免疫抑制剂使用率均无统计学差别(p>0.05)。3.免疫荧光法检测PLA2R在IMN组患者肾小球较SMN组明显沉积(P<0.05);IgG4在IMN组患者肾小球较SMN组明显沉积(P<0.05)。肾组织PLA2R检测的灵敏度低于IgG4(61.5%vs 84.6%),特异度高于IgG4(61.5%vs 55.2%)。4.IMN组PLA2R与IgG4共阳性者率为61.5%(8/13),共阴性者率为15.4%(2/13),PLA2R(+)而IgG4(-)者无,IgG4(+)而PLA2R(-)23.1%(3/13);SMN组PLA2R与IgG4共阳性率为17.2%(5/29),共阴性率为41.4%(12/29),PLA2R(+)IgG4(-)13.8%(4/29),IgG4(+)PLA2R(-)27.6%(8/29)。IMN组PLA2R与IgG4共阳性率高于SMN组(61.5%vs 17.2%,p<0.05),IMN组共阴性率小于SMN组(15.4%vs 41.4%,p<0.05)。5.治疗前PLA2R≥1组Up/Ugcr的平均值高于PLA2R<1组(6.4 vs 3.1),经过6个月的治疗,下降终点的平均值(1.8 vs 1.9)。PLA2R≥1及PLA2R<1组e GFR治疗前起始点的平均值(61.8 vs 60.4)和经过6个月治疗终点的平均值(69.8 vs 63.3)以及6个月内e GFR的变化趋势大致相同。结论:1.PLA2R及IgG4在特发性膜性肾病患者的肾组织中明显沉积,二者均有助于鉴别诊断特发性膜性肾病与继发性膜性肾病。2.膜性肾病患者经糖皮质激素和(或)免疫抑制剂治疗前,肾组织PLA2R的表达情况与经二者治疗后的疗效无关。