黄花苜蓿(Medicago falcata)在耐冷、耐盐和抗旱等方面具有突出的抗逆特性,是进行豆科牧草品种改良的优异种质资源和重要基因库。许多研究表明,NAC转录因子家族在调控植物生长发育以及逆境应答过程中发挥重要作用。本研究以实验室已从黄花苜蓿中克隆获得的1个cDNA序列为基础,推导其为编码206个氨基酸的蛋白质,而其9-142位氨基酸序列为公认的NAM结构域,且该蛋白与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtNAC34的同源性最高。因此,本研究将该cDNA序列命名为MfNAC34基因。MfNAC34的分子量为23.52kDa,理论等电点为4.24。生物信息学分析及预测显示:MfNAC34是无信号肽和跨膜结构域且定位在细胞核内的亲水性蛋白。烟草(Nicotiana Benthamiana)表皮细胞瞬时表达MfNAC34-sGFP融合蛋白,激光共聚焦显微镜观测结果进一步验证MfNAC34定位于细胞核内。酵母AH109细胞转化实验验证了MfNAC34具有转录激活功能,且转录激活结构域位于蛋白的C端。MfNAC34基因在黄花苜蓿茎中的表达最大,且NaCl、山梨醇和0℃胁迫均可调节其在根、茎、叶中的表达,说明MfNAC34可能参与黄花苜蓿应答盐、干旱和低温等非生物胁迫的适应过程。同时,构建了植物超表达载体pPZP221(35S-MfNAC34-NOS),通过花序浸染法转化拟南芥(Arabidopsis),PCR检测获得了T1代转基因植株。经继代培养,获得了T3代转基因拟南芥植株,为进一步探究MfNAC34参与抗逆性的功能提供基础实验材料。