用杆状病毒系统表达丙型肝炎病毒结构蛋白

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lzy19900924
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丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)结构蛋白的核心蛋白(C)和包膜蛋白2(E2)含有多个T细胞表位和中和抗体表位,可诱导机体产生保护性免疫应答。本实验用PCR扩增HCV结构区基因,克隆到杆状病毒表达载体pFastBacl中,构建成重组转座载体pFB1-CEE,转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性菌落,抽提大分子质粒DNA,获得含HCV结构区基因的重组杆状病毒穿梭载体Bac-CEE,脂质体介导转染Sf9昆虫细胞,出现细胞病变后,收集含有重组杆状病毒颗粒的培养上消,重新感染sf9细胞,收集sf9细胞,进行12.5%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,可见表达的蛋白条带。本实验所表达的HCV结构蛋白将为进一步研制适用于人的HCV预防性疫苗打下工作基础。
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