杨桃多糖的提取及免疫活性研究

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植物多糖是由许多相同或不同的单糖或其衍生物以糖苷键相链接组成的化合物,普遍存在于自然界植物体中,包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。大量研究表明,许多植物多糖具有广泛的保健和药理作用,具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、抗氧化、防衰老、保护肝脏等作用,一般毒性较低。杨桃(Averrhoa caramhola L.),在广东、福建、海南等省资源丰富,具有驱风去热、生津止渴、解酒毒、止血、拔毒生肌等多种功效。目前,从杨桃中提取多糖及其在免疫调节方面应用的研究尚未见有文献报道。本实验对杨桃采用水煮乙醇沉淀法粗提,复合酶法去蛋白,凝胶过滤柱层析进一步纯化后得到杨桃多糖(Averrhoa caramhola L.Polysaccharides,ACPS)。通过紫外、红外扫描进行纯度和结构鉴定及分子量测定。结果表明,杨桃多糖的提取率为3.42%,总糖含量为70.5%,提取纯化的杨桃多糖是均一组分,纯度高,可能含有三种单糖。对杨桃采用水煮乙醇沉淀法粗提,复合酶法去蛋白,凝胶过滤柱层析进一步纯化后得到杨桃多糖。通过紫外、红外扫描进行纯度和结构鉴定及分子量测定。结果表明,水煮乙醇沉淀法提取的杨桃多糖,收率高,纯度高。紫外扫描结果显示在波长260nm处几乎没有吸收峰,而280nm处无吸收峰,可见复合酶法去蛋白的效果明显。红外光谱分析结果表明,样品结构中含有多种单糖基团。杨桃多糖的提取率为3.42%,总糖含量为70.5%,提取纯化的杨桃多糖是均一组分,纯度高,且可能含有三种单糖。通过对小鼠的脏器/体重比、胸腺指数和脾细胞中的IL-2和IL-6含量测定以及足跖增厚法、小鼠鼠碳廓清实验,结果发现,杨桃多糖低、中、高剂量组均可显著增加小鼠的脏器质量和脏器/体重比值,各剂量组的脏器质量和脏器/体重比值与对照组相比均有显著性差异(p<0.05)。杨桃多糖各剂量组小鼠的胸腺相对重量与对照组相比具有显著性差异(p<0.05),胸腺指数也有显著性差异(p<0.05)。通过足跖增厚法对小鼠的细胞免疫功能进行评价,结果显示,杨桃多糖对小鼠的足跖厚度有增厚的作用,可见,杨桃多糖对小鼠的细胞免疫功能有一定的增强作用,可以显著增强组成机体特异性免疫的细胞免疫功能。小鼠鼠碳廓清实验发现杨桃多糖各剂量组的吞噬指数比对照组都有增加,中、高剂量组有明显差异,说明杨桃多糖对小鼠单核-巨噬细胞的吞噬功能有明显的增强作用。杨桃多糖中、高剂量组小鼠的IL-2和IL-6水平均显著高于对照组,表明杨桃多糖可以增强机体的特异性体液免疫应答,从而参与机体的免疫调节作用。
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