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一、人类急性单核细胞白血病细胞系SHI1高致瘤性试验及其机理的研究 目的:研究SHI-1细胞在裸小鼠皮下高致瘤性及其机制。方法:按1×107、5×106、2.5×106、1×106的浓度梯度分4组对裸小鼠进行皮下接种,验证SHI-1细胞高致瘤的特性。然后用MTT法检测SHI-1细胞对NK细胞敏感性、R显带染色体核型分析、FISH检测P53基因的缺失及P53基因测序检测突变等方法探讨SHI-1细胞高致瘤机制。结果:1组~4组SHI-1细胞裸小鼠皮下致瘤率分别为100%、66.7%、40%、O%;MTT法检测SHI-1、K562及NB4细胞对NK细胞敏感性的实验表明,SHI-1细胞在效靶比为40:1、20:1、10:1时均低于其它二者;R显带染色体核型分析揭示SHI-1细胞的核型为:46,XY t(6;11)(q27;23),del(17)(p11)[20];FISH检测显示SHI-1细胞中一条17号染色体存在P53基因的缺失,另一条17号染色体上P53等位基因PCR产物测序结果证实存在点突变。结论:1、SHI-1细胞在裸小鼠皮下的高致瘤性是稳定可靠的。2、SHI-1细胞对NK细胞的高度耐受以及P53基因功能丧失是造成SHI-1高致瘤的重要原因。 二、耐As2O3的白血病细胞系SHI-1/AS2的建立及其生物学特性的初步研究 目的:在原有细胞系SHI-1基础上建立耐As2O3细胞系——SHI-1/AS2。方法:通过短时间将SHI-1细胞同As2O3共培养,逐步诱导SHI-1细胞产生对于As2O3的耐药性。建系后用含1μMAs2O3培养液长期培养,保存其耐药性。然后用MTT法检测其对As2O3的耐药倍数,同时利用形态学、染色体核分析及M-FISH等检测方法对其生物学特性进行初步研究。结果:SHI-1/AS2细胞对于As2O3耐药性为SHI-1的2.2倍,形态学上SHI-1/AS2保持了同SHI-1相同的特征。R显带染色体核型分析及M-FISH分析结果表明SHI-1/AS2细胞系在原代细胞已有染色体异常基础上出现了更