人参皂苷是人参中的重要活性成分,其中原人参二醇型、原人参三醇型人参皂苷在炮制及体内代谢过程中被水解生成的原人参二醇和原人参三醇,因其生物活性和生物利用度得到显著提高,被认为是人参在体内发挥药理作用的最终物质。本课题以人参茎叶总皂苷为原料,首先筛选、优化了人参茎叶总皂苷的水解工艺,提高了原人参二醇和原人参三醇的制备得率;然后借助分子印迹技术制备了高特异性的吸附材料,构建了原人参二醇和原人参三醇的富集和纯化工艺。论文主要研究结果如下:(1)比较了酸解、碱解和酶解工艺对人参茎叶总皂苷水解制备原人参二醇和原人参三醇得率的影响,并优化了水解工艺。结果显示,酸解工艺中,盐酸添加量为0.5m L、反应温度90℃、反应时间4 h时,原人参二醇的平均得率为0.21%;盐酸添加量为0.25 m L、反应温度70℃、反应时间4 h时,原人参三醇的平均得率为1.84%。酶解工艺中,50 U/m L的β-葡萄糖苷酶60μL、底物浓度4 mg/m L、反应温度70℃、反应时间8 h时,原人参二醇和原人参三醇的平均得率分别为0.07%、0.15%。碱解工艺中,Na OH添加量为0.75 g、反应温度160°C、反应时间8 h时,原人参二醇和原人参三醇平均得率分别为2.44%、10.08%。以碱添加量、反应温度和反应时间设计单因素试验,得到最佳碱解工艺条件为:Na OH添加量为0.75 g、反应温度180°C、反应时间12 h,该条件下原人参二醇和原人参三醇含量分别为40.60±0.80 mg/g、141.89±1.41 mg/g,平均得率分别为4.06%、14.19%。(2)分别以原人参二醇和原人参三醇作为单模板分子、双模板分子,以β-谷甾醇为虚拟模板,采用本体聚合法制备分子印迹聚合物,并比较了不同聚合物的吸附特性。结果显示,原人参二醇单分子模板聚合物和原人参三醇单分子模板聚合物对各自模板分子的饱和吸附量分别为14.82±0.31 mg/g和12.31±0.44 mg/g;双模板分子印迹聚合物对原人参二醇和原人参三醇的饱和吸附量分别为10.70±0.50 mg/g和11.20±0.24 mg/g;β-谷甾醇虚拟模板聚合物对原人参二醇和原人参三醇的饱和吸附量分别为5.11±0.55 mg/g和6.66±0.38 mg/g。(3)分别以四种印迹聚合物为填料制备固相萃取柱,采用固相萃取法纯化原人参二醇和原人参三醇。原人参二醇印迹聚合物、原人参三醇印迹聚合物、双模板印迹聚合物以及虚拟模板印迹聚合物对原人参二醇和原人参三醇的吸附率分别为80.7±2.23%和40.6±1.36%、82.1±1.54%和41.2±0.70%、73.7±1.00%和35.4±1.40%以及26.3±1.34%和10.4±2.10%。综上所述,本研究通过比较不同降解方法对人参茎叶皂苷提取物转化为原人参二醇和原人参三醇的影响,筛选出原人参二醇和原人参三醇得率高的方法,且降解过程不需要添加有机溶剂,是一种绿色环保的水解方法;通过比较不同模板制备的分子印迹聚合物对原人参二醇和原人参三醇的吸附效果,构建了一种简单、高效的纯化方法。