甲状腺癌是内分泌系统常见的恶性肿瘤,近年来,其发病率不断上升,在多个国家已成为发病率上升最快的恶性肿瘤之一。随着临床检查技术及诊断技术的不断提高,大多数患者能得到及时的诊断;然后通过手术治疗、术后内分泌抑制治疗、放射性碘131治疗及放化疗等有效的治疗措施,取得比较理想的预后,同时大大提高了甲状腺癌患者的长期生存率。但是由于甲状腺癌具有比较强的侵袭迁移性,故而有不少患者在接受治疗后出现原位复发或者远处转移等现象,给患者带来了极大的痛苦和负担。因此,研究甲状腺癌发病的相关流行病学因素和疾病进展过程中涉及到的遗传学规律,进一步阐明甲状腺癌发病及癌细胞侵袭转移的相关分子学机制,并在此基础上寻找与甲状腺癌中差异性表达的分子标记物和潜在的诊疗干预靶点,对于提高甲状腺癌的防治水平,改善预后及提高患者生存率具有十分重要的临床意义。随着分子生物学及表观遗传学的快速发展,分子诊疗和靶向治疗也成为肿瘤个体化诊疗的新方向,关于甲状腺癌发生发展的相关分子机制研究也取得了重大的进展。其中基因的异常表达及信号通路活性的改变成为甲状腺癌相关分子机制的研究热点,众所周知,基因的表达受到细胞中小分子RNA的调控。micro RNA是机体中一类长度约为19~22个核苷酸的内源性单链非编码RNA分子,具有高度保守性,可参与调控肿瘤的发生发展进程。micro RNA可通过与靶基因信使RNA(m RNA)之间完全或不完全碱基互补配对结合的方式,在转录后水平调控靶m RNA的翻译过程,影响相关蛋白质的合成,进而参与调控细胞生长、分化、增殖、周期及凋亡等多种病理生理学过程。近年来,micro RNA在甲状腺癌发生发展中的作用也备受研究者的关注,已证实可调控肿瘤发生发展进程和调控肿瘤细胞各种恶性生物学特性的micro RNA也非常多,包括miR-146b-5p、miR-222-3p、micro RNA-106b、micro RNA-145以及micro RNA-146b等。这些异常表达的micro RNA为甲状腺癌的诊疗提供了新的方向和干预靶点。MicroRNA-497(miR-497)是由人染色体17p13.1区域的MIR497HG基因(基因ID:100506755)内含子区域编码的一种高度保守的micro RNA,是micro RNA-15家族的成员之一。在多种实体恶性肿瘤中,miR-497可发挥肿瘤抑制因子的作用,抑制肿瘤的生长进程以及肿瘤细胞的各种恶性生物学特性。但是目前miR-497在甲状腺乳头状癌中的具体作用和相关作用机制尚未有相关研究报道。基于此研究背景,我们提出:在甲状腺乳头状癌中,是否存在miR-497的异常表达,其异常表达是否与甲状腺乳头状癌的发展进程和病理特征有关?MiR-497如何调控甲状腺乳头状癌的发生发展进程,其调控作用的相关机制及信号通路是什么?本论文的主要研究目的就是探讨miR-497在甲状腺乳头状癌中的表达,同时在细胞水平和动物整体水平进一步研究其相关调控机制。主要研究内容包括以下三个方面:1.首先研究人甲状腺乳头状癌组织中miR-497的表达情况及其临床意义。通过实时荧光定量PCR的方法检测人甲状腺乳头状癌组织中miR-497的表达情况,然后运用统计学分析手段评估miR-497的表达与甲状腺乳头状癌各临床病理学指标之间的相关性,进一步探讨miR-497在甲状腺乳头状癌发生发展的过程中可能发挥的作用。2.MiR-497对人甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1生物学行为的影响及作用机制。本部分实验我们在甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1上转染miR-497 mimic模拟内源性miR-497的表达,而后测定细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化,进一步探讨miR-497对甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1生物学功能的影响;并通过生物信息学的方法预测其可能的靶基因。3.MiR-497对TPC-1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及作用机制。本部分实验利用裸鼠皮下移植瘤的方法,进一步在个体水平上证实miR-497抑制甲状腺乳头状癌发生发展的相关机制。首先通过裸鼠背部皮下注射稳定表达miR-497或negtive micro RNA control的TPC-1细胞制备裸鼠移植瘤模型;待成瘤后检测瘤体的生长的情况,测定瘤内miR-497和BDNF基因及下游PI3K/AKT信号通路的表达情况,从而在动物整体水平上评估miR-497对甲状腺乳头状癌的抑制作用及作用机制。本研究的意义在于检测了甲状腺癌组织中miR-497的表达情况及其与甲状腺癌病理特征之间的关系;并在细胞水平,探讨了miR-497对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖、侵袭及迁移等生物学行为的影响及相关作用机制;此外,在动物整体水平,进一步验证miR-497对甲状腺乳头状癌的作用及作用机制。为阐明miR-497参与调控甲状腺乳头状癌的机制提供新的方向,也为临床上甲状腺乳头状癌的诊疗提供新的潜在作用靶点。本研究的创新在于系统的探讨了miR-497在甲状腺乳头状癌发病中的作用,其可能涉及的作用机制及相关信号通路。