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毛蕊花糖苷是典型的苯乙醇苷类物质,普遍存在于双子叶植物中,研究发现它具备抗氧化、护肝、抗炎、神经保护、免疫调节等多种生理功能。本文以毛蕊花糖苷为主要研究对象,对其体外模拟消化产物、与大鼠肠道菌群体外共培养物以及主要消化产物对黄嘌呤氧化酶的体外抑制作用进行了研究。研究结果如下:1.根据毛蕊花糖苷、羟基酪醇、咖啡酸的紫外吸收性质,结合三种物质高效液相检测条件,建立了同时检测三种物质的高效液相色谱法。结果表明:采用Waters e2695型高效液相色谱仪,色谱柱为Waters Symmetry C18柱(5μm,250mm×4.6mm);流动相为色谱级甲醇(A)和体积分数0.1%甲酸水溶液(B),比例为40:60;流速0.7mL/min;2998PDA二极管阵列检测器,检测波长280nm,柱温35℃;进样量10μL,毛蕊花糖苷标准曲线的线性回归方程为 y=4.474x+5.224,R2=0.99996;加样回收率为 102.71%,RSD为1.65%。咖啡酸标准曲线的线性回归方程为y=20.687x-3.392,R2=0.99953;加样回收率为101.24%,RSD为1.15%。羟基酪醇标准曲线的线性回归方程为 y=4.716x-17.901,R2=0.99987;加样回收率为 98.81%,RSD 为 1.79%。系统的方法学考察显示,此方法具有良好的专属性、重复性,结果精确。2.将毛蕊花糖苷分别用pH2盐酸溶液、人工唾液、人工胃液、人工小肠液水解4h及模拟生物体消化顺序体外累加消化4h后,利用HPLC及LC-MS检测水解产物,发现只有少部分毛蕊花糖苷(8.33-27.85%)发生酯键及糖苷键的断裂生成咖啡酸和羟基酪醇,大部分仍保持毛蕊花糖苷原型。3.将毛蕊花糖苷和SD大鼠肠道菌群体外共培养不同时间后,利用HPLC及LC-MS检测其代谢产物,结果表明毛蕊花糖苷代谢可能生成了咖啡酸、羟基酪醇和间甲氧基苯乙酸等代谢产物。随着共培养时间的增长,咖啡酸和羟基酪醇上的酚羟基上的氢均又进一步分别被-CH3和-SO3H所取代,而羟基酪醇的衍生物被氧化为酸。但反应最终主产物之一是否为间甲氧基苯乙酸仍需进一步检测确定。4.利用黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤生成尿酸的反应机理,分别将毛蕊花糖苷水解液、毛蕊花糖苷、咖啡酸及羟基酪醇加入反应体系,检测尿酸生成量,与正常组产生的尿酸的量比较,检测对黄嘌呤氧化酶是否具有抑制作用。实验研究结果表明毛蕊花糖苷水解后对XOD的抑制作用强于水解前,经肠菌培养后对XOD的抑制作用增强地最为显著;毛蕊花糖苷、咖啡酸及羟基酪醇对黄嘌呤氧化酶均有抑制效果,半数抑制浓度IC50分别是81.15μg/mL、32.06μg/mL、27.04μg/mL。实验数据表明咖啡酸、羟基酪醇对黄嘌呤氧化酶的体外抑制作用均强于毛蕊花糖苷,说明毛蕊花糖苷在体内有可能是通过其代谢产物对黄嘌呤氧化酶起抑制作用的。