基于同源重组策略的新型人源染色体靶向载体介导的人β-珠蛋白基因簇转移的研究

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xingchen8888
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  本文对基于同源重组策略的新型人源染色体靶向载体介导的人β-珠蛋白基因簇转移进行了研究。文章利用新型的人源染色体靶向BAC载体(BACMS)对完整的人β-珠蛋白基因簇进行亚克隆,获得了含有完整的人β-珠蛋白基因簇(Beta-globingenecluster,BGGC)人源染色体靶向BAC载体(BACMS/BGGC),成功构建了含有完整人β-珠蛋白基因簇人源染色体靶向载体;电穿孔转染K562细胞后获得了2株定点整合的单细胞克隆,目的DNA定点整合在7q36.2,还获得了1株既有定点整合又有随机整合单克隆细胞,外源DNA整合在7q36.2和1qter。这些细胞克隆都能以可调控的方式表达目的基因。从而证实了基于同源重组策略的新型人源染色体靶向BAC载体能介导成簇基因的转移,能引导目的DNA在基因组上进行同源重组进而实现成簇基因在基因组上的定点整合,并依赖基因簇自身的调控方式对目的基因进行可调控表达。但是,在染色体的不同区域进行同源重组,并不能有效提高同源重组的效率。   
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