目的:肠病毒71型(enterovirus71，EV71)属于小RNA病毒，是人类手足口病主要病原体之一。EV71感染儿童会造成严重的神经并发症甚至死亡，其致病机制目前尚不十分清楚，缺乏有效的预防和治疗手段。姜黄素是食用香料姜黄中的主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等活性，它还具有广泛的抗病毒活性，但是其对EV71复制的影响目前尚无报道。本研究通过体外实验验证姜黄素是否具有抗EV71活性及其抗病毒机制。　　方法:(1)为了验证姜黄素对EV71复制的作用，用EV71感染Vero细胞并加入不同浓度的姜黄素，显微镜下观察CPE，实时定量PCR法检测病毒RNA的变化，Western blotting检测病毒VP1的变化，TCID50法检测病毒滴度的变化;(2)为了进一步明确姜黄素抑制EV71复制的时间性，在感染后不同时间点加入姜黄素，通过显微镜下观察CPE，Western blotting检测病毒VP1变化;(3)为了检测姜黄素是否可直接灭活EV71，在EV71感染的同时加入姜黄素，感染后7h显微镜下观察CPE，Western blotting检测病毒VP1的变化;(4)为了明确姜黄素发挥抗EV71作用的机制，通过一下几个方面进行检测:①在EV71感染后加入姜黄素，用ROS特异性荧光探针来检测加入姜黄素及ROS抑制剂NAC后ROS的变化，并通过Western blotting检测VP1的变化;②在EV71感染后加入不同剂量的姜黄素，通过Western blotting检测姜黄素对p-ERK及ERK的影响;③在EV71感染后加入不同剂量的姜黄素或是感染后不同时间点加姜黄素处理，显微镜下观察细胞核形态并通过Western blotting检测凋亡标志性蛋白PARP-1与caspase-3的活化;④EV71感染后分别加入姜黄素和蛋白酶体抑制剂MG132，Western blotting检测病毒VP1变化、泛素—蛋白酶体系统介导降解的p53和p21的变化，通过荧光底物检测26S蛋白酶体的变化;⑤在EV71感染后加入姜黄素，Western blotting检测GBF1和PI4KB的变化;用特异siRNA分别干扰GBF1和PI4KB的表达，EV71感染后检测病毒VP1蛋白的表达。　　结果:(1) EV71感染后加入姜黄素明显减少EV71引起的CPE，40μmol/L姜黄素明显降低EV71 RNA合成、VP1蛋白的表达和病毒滴度;(2)EV71感染后越早加入姜黄素对病毒引起的CPE及病毒VP1抑制作用越明显;(3)40μmol/L姜黄素与EV71同时加入细胞，7h后观察姜黄素可以抑制病毒诱导的CPE并降低病毒VP1的表达;姜黄素发挥抗EV71作用的机制有以下结果:①EV71感染能引起细胞中ROS水平增加，姜黄素与NAC预处理都能明显抑制病毒引起的ROS增加，但姜黄素与NAC均不能减少EV71 VP1的表达;②EV71感染可以活化ERK途径，加入姜黄素后可以抑制VP1的表达，但不能改变ERK的活化;③姜黄素能明显降低EV71诱导细胞凋亡的核形态改变，并以剂量依赖的方式减少凋亡标志性蛋白PARP-1与caspase-3的活化，且越早加入姜黄素对凋亡的抑制作用越明显;④EV71感染引起泛素—蛋白酶体系统活化，使p53和p21被降解而表达下调，而姜黄素处理能增加p53和p21表达，与MG132相同，二者均能抑制VP1的表达和26S蛋白酶体活性;⑤EV71感染后加入姜黄素降低GBF1和PI4KB的蛋白表达;siRNA干扰GBF1和PI4KB表达可以降低VP1的表达。　　结论:(1)姜黄素可以抑制EV71的复制，该抑制作用发生在病毒感染的早期;(2)姜黄素可降低EV71感染诱导的凋亡、下调GBF1和PI4KB蛋白的表达以及调节UPS等机制抑制EV71的复制;(3)姜黄素抑制EV71的活性与其抗氧化活性、调节ERK途径活性无关。