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肉鸡胫骨软骨发育不良(Tibial dyschondroplasia,TD)是一种以生长板无血管化和无矿化为特征的重要家禽胫跗骨疾病。它主要引起软骨细胞的异常分化和家禽的跛行,从而降低动物的生长性能,对家禽业造成巨大的经济损失。 1.HIF-1α抑制剂在福美双诱导的TD上的作用 本研究旨在评估缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-Inducible Factor-1α,HIF-1α)抑制剂FK228在福美双诱导的TD上的作用和HIF-1α和Hsp90之间的关系。将150只肉鸡随机分成3组:对照组、福美双组、FK228组。通过RT-qPCR检测第10天和14天HIF-1α、Hsp90和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的表达;Western blot检测第14天HIF-1α和Hsp90蛋白表达水平。结果显示:在TD病程中HIF-1α显著上调(P<0.05),VEGF没有显示变化(p>0.05)。HIF-1α抑制剂能够显著下调HIF-1α和VEGF基因的表达和蛋白的表达水平(P<0.05),从而减少生长板的尺寸和肉鸡的跛行。综上所述,HIF-1α和VEGF在肉鸡胫骨软骨发育不良非血管化的生长板上在形成中起着重要作用,这可能就是作为防治肉鸡无血管化生长板和跛行的HIF-1α抑制因子作用的靶点。HIF-1α抑制因子可以作为预防肉鸡胫骨软骨生长板无血管化、生长跛行和恢复生长板血管生成的新靶标。 2.Hsp90抑制剂EGCG和芹黄素在肉鸡胫骨软骨发育不良上具有治愈生长板的作用 热休克蛋白90(Heat-shock protein90,Hsp90)在动物组织中是一种前血管生长因子,研究表明在肉鸡TD的病例中Hsp90表达量增加。本研究旨在评估Hsp90抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和芹黄素在福美双诱导的肉鸡TD中的作用。本研究采用H&E对生长板进行组织学观察,RT-qPCR检测Hsp90基因的表达量。结果表明:肉鸡TD的发生伴随血管减少,软骨细胞分化发生改变,Hsp90表达量显著增加(P<0.05)。然而,TD肉鸡给予EGCG和芹黄素后发现软骨细胞柱状组织修复和Hsp90表达活性被降低(P<0.05),最终跛行消失。结果表明Hsp90是TD发生的一个关键因素; EGCG和芹黄素通过抑制Hsp90基因的表达来有效的治疗TD,减少跛行和肉鸡腿的畸形。 3.HIF-1α抑制剂Apigenin在生长板软骨治愈上的作用 本研究旨在了解缺氧诱导因子(HIF-1α)抑制剂的机制和芹黄素在福美双诱导TD上的抗氧化能力。将150只肉鸡随机分为3组:对照组、福美双组、芹黄素组。分别于试验的第10天和第14天采用RT-qPCR方法对HIF-1α基因表达量进行检测。结果表明:与对照组相比,HIF-1α基因表达量在福美双诱发TD期间显著上调(P<0.05);芹黄素组HIF-1α表达量显著下调(P<0.05),生长板尺寸和跛行减少。另外,福美双诱导肝脏中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和丙二醛(MDA)含量的增加,而福美双组抗氧化酶(SOD; GSH-Px)和碱性磷酸酶(ALP)值降低;而芹黄素组各项指标均接近正常组。结果表明:HIF-1α抑制剂能够恢复肉鸡跛行和非血管化的生长板,且芹黄素能够有效的改善福美双引起的肝脏损伤和氧化失衡。