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目的:目前已证实六神曲(MMF)能促进食积小鼠胃排空,降低胃内pH,增加胃蛋白酶含量并增加食积小鼠乳酸杆菌、双歧杆菌的表达,降低中性菌大肠杆菌和肠球菌的表达。本研究旨在建立大鼠功能性消化不良模型,探讨六神曲对FD的药效作用及发挥药效的肠道菌群-免疫机制。方法:将56只雄性10日龄Sprqague-Dawley幼鼠随机分为正常对照组(Con,蒸馏水,n=8)、单纯0.1%碘乙酰胺灌胃诱导大鼠功能性消化不良组(0.1%IA,n=8)、0.1%碘乙酰胺复合水平台睡眠剥夺诱导大鼠功能性消化不良组(FD,n=8)、六神曲低剂量组(MMF 1g/kg,n=8)、六神曲高剂量组(MMF 3g/kg,n=8)、阳性药组(Mosa.2mg/kg,n=8)。大鼠8周龄开始口服给药21天。给药后检测大鼠糖水偏嗜度和胃排空率;采用苏木精-伊红染色(HE)检测大鼠十二指肠病理变化;采用Elisa试剂盒检测大鼠十二指肠中胃动素(MTL)以及血清中IFN-λ、TNF-α、IL-6的含量;采用16Sr DNA扩增子测序检测大鼠结肠内容物肠道菌群结构的影响,并对菌群潜在的代谢通路进行了预测;采用气相色谱-质谱联用法(GC/MS)检测大鼠结肠内容物中短链脂肪酸的变化。结果:1.模型组与正常对照组比较。FD组大鼠糖水偏嗜率明显降低,与Con组相比较有统计学差异,50.44%±17.19%(FD)vs.66.79%±14.26%(Con),P<0.05;而0.1%IA组与Con组相比无显著性差异。与Con组相比,FD组大鼠胃排空率显著降低(20.60%±13.26%vs.43.05%±6.72%,P<0.05);病理组织切片观察到十二指肠绒毛结构紊乱,固有层有明显的炎症细胞浸润;十二指肠中MTL含量显著降低(597.20±45.71 pg/mL vs.520.50±65.03 pg/mL,P<0.01);血清中IFN-λ、TNF-α含量显著增加(P<0.01);血清中IL-6含量显著降低(130.1±11.76 pg/mL vs.217.4± 14.6 pg/mL,P<0.001)。0.1%IA 组大鼠胃排空率无明显变化(P>0.05)。16S rDNA扩增子测序结果表明,与Con组相比,FD组结肠内容物微生物物种丰富度显著升高。2.给药组与模型组比较:糖水偏嗜实验结果显示,与FD组相比,六神曲不同剂量组(MMF 1g/kg和3g/kg)与阳性药组(Mosa.)大鼠糖水消耗率均明显升高(P<0.05,P<0.05或P<0.01 vs FD组);胃排空结果显示:MMF 3g/kg组胃排空率显著高于FD组(P<0.05);HE染色结果显示,MMF 3g/kg可明显增加FD大鼠十二指肠绒毛顶部上皮细胞长度,改善十二指肠绒毛的萎缩,减少杯状细胞数目;ELISA结果显示,与FD组相比,MMF 1g/kg和3g/kg给药组能显著升高FD大鼠十二指肠MTL含量(P<0.01或P<0.01 vs.FD组);与FD组相比,MMF 1g/kg和3g/kg给药组能显著降低血清中IFN-λ、TNF-α含量(P<0.001或P<0.001 vs.FD)。除此之外,16S rDNA扩增子测序结果显示MMF引起了 FD大鼠结肠内容物菌群结构和功能的变化。结论:六神曲可以促进FD大鼠糖水偏嗜度、胃排空,改善FD大鼠十二指肠炎症,显著增加大鼠十二指肠中MTL、IL-6含量,显著降低血清中IFN-λ、TNF-α含量,导致FD大鼠结肠内容物菌群结构的变化和短链脂肪酸含量的变化。由此推测六神曲可通过影响FD大鼠肠道菌群结构的改变,引起代谢产物SCFAs的变化,进而通过对免疫功能产生影响,发挥改善功能性消化不良的药效。