青翘化学成分提取分离及初步活性研究

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连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.) Vahl的干燥果实,是一味常用中药。连翘分为青翘和老翘,老翘通过简单的晒干即可使用,青翘使用时经蒸或煮炮制而得,我们前期研究表明炮制后连翘的化学成分会发生变化,但这些变化的化学成分是否对连翘的药效有影响尚未见报道,因此本文主要对连翘炮制后含量发生变化的化学成分进行了提取分离,并对其生物活性进行了初步研究,试图对青翘的炮制工艺研究提供可靠依据。主要研究工作如下:1、化学成分提取分离:连翘70%甲醇提取物运用大孔树脂、中压制备液相色谱以及高效半制备液相色谱等方法分离得到五个炮制后含量变化的化合物,通过UV、IR、NMR、MS等波谱分析方法对这五个化合物进行了鉴定结构,其中确定了三种化合物的结构,分别是连翘酯苷A、五福花苷酸和连翘酯苷C。2、化学成分生物活性研究:通过酶标仪测量吸光度的方法,研究对胰脂肪酶的抑制作用,研究表明提取中的化学成分中,对胰脂肪酶有明显的抑制作用的化合物为五福花苷酸和连翘酯苷C,而且五福花苷酸对胰脂肪酶的抑制作用尤为明显;利用高效液相色谱法研究了化学成分对磷酸二酯酶的抑制作用,结果发现,只有连翘酯苷A表现出对磷酸二酯酶明显的抑制作用;最后,利用琼脂扩散法研究了这五种化学成分对金黄葡萄球菌的抑制作用,其中连翘酯苷C对金黄葡萄球菌的抑制作用最为明显,其次有抑制作用的为连翘酯苷A和一种未知化学成分,其余两种化合物表现出对金黄葡萄球菌很微弱的抑制作用。3、连翘果实中活性酶对连翘酯苷A的酶解作用研究:以连翘酯苷A含量变化作为指标,采用高效液相色谱的分析方法探究了经不同温度孵育的连翘粗酶液对连翘酯苷A的影响,结果表明:连翘中所含的活性酶对连翘酯苷A有降解作用,青翘炮制能起到杀酶的效果,青翘炮制后,有效提高连翘酯苷A的含量;青翘经煮4-12min即可起到杀酶的作用;进一步通过研究发现活性酶对连翘酯苷A分解产物之一为咖啡酸
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