目的:应用同位素标记相对和绝对定量(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation,iTRAQ)技术联合液相色谱-串联质谱(Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS)技术筛选和鉴定经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后发生造影剂急性肾损伤(contrast-induced acute kidney injury,CI-AKI)患者尿液差异蛋白,寻找CI-AKI早期诊断生物标记物。方法:收集2015年7月1日至2015年12月31在宁波市第二医院行PCI术前及术后6h、24h、48h患者尿液,根据2012KDIGO急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)诊断标准,将患者分为:(1)CI-AKI组(PCI术后发生AKI);(2)阴性组。应用iTRAQ技术比较CIAKI组术后6h、24h、48h与术前以及CI-AKI组术后24h与阴性组术后24h的差异蛋白。将筛选出的差异蛋白按照差异倍数排序,选出每组差异倍数前10位中与CI-AKI相关的差异蛋白进行GO(Gene ontology)富集分析,了解新型生物标志物在CI-AKI可能的发生机制,并进行多组数据进行交集分析,寻找CI-AKI潜在的生物标志物。结果:48例行PCI术患者中有6例发生CI-AKI,4例男性,2例女性。(1)CI-AKI组术后6h:较术前差异蛋白151个,上调74个,下调77个;差异倍数前10位与CI-AKI相关的差异蛋白为免疫球蛋白G2重链(IGHG2)、人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)、血清载体蛋白A1(APOA1)、人过氧化物还原酶5(PRDX5)。(2)CI-AKI组术后24h:1)较术前差异蛋白167个,上调106个,下调61个;差异倍数前10位与CI-AKI相关的差异蛋白为癌细胞分裂周期蛋白(CDC42)、人类β防御素(HBD)、人过氧化物酶2(PRDX2)。2)较阴性组术后24h差异蛋白191个,上调77个,下调114个;差异倍数前10位与CI-AKI相关的差异蛋白为:PRDX2、水通道蛋白1(AQP1)、血清结合珠蛋白(HP)、人乳铁蛋白(LTF)、HBD。(3)CI-AKI组术后48h组:较术前差异蛋白160个,上调105个,下调55个;差异倍数前10位与CI-AKI相关的差异蛋白为AQP1、人肽酶抑制因子(PI16)。(4)通过交集分析,结果用韦恩图表示。结果显示CI-AKI组各时段与术前比较的差异蛋白以及CI-AKI组术后24h与阴性组术后24h共有的差异蛋白有14个,其中与CI-AKI相关的差异蛋白为AQP1、HBD-1、MASP2。以上都是定性(5)差异蛋白GO富集分析结果:1)分子功能:主要属于结合各种类型蛋白(包括受体)和酶的调控等功能;2)生物学过程:主要参与代谢、细胞活动和参与应激反应等过程;3)细胞定位:主要属于细胞外区域、囊泡、细胞器膜等区域。结论:(1)iTRAQ技术能够进行绝对和相对定量,检测结果精确并具有良好的可重复性,弥补了传统技术的不足。能有效筛选出CI-AKI差异蛋白。(2)AQP1、HBD-1、MASP2在CI-AKI患者尿液中含量发生显著上调,三者与CI-AKI发病机制有关,是潜在的新型生物标志物。