本研究克隆获得了黄鳝wt1、foxl2、dax1和amh基因的全长序列,并分析了它们在黄鳝性腺不同发育时期以及不同组织间的表达差异。序列分析结果发现wt1、foxl2、dax1在不同物种间保守性较高,而amh在不同物种间保守性并不高。18s、ef1α和rpl17为黄鳝性腺发育研究中稳定的内参基因,可以对目的基因进行矫正。半定量研究结果表明,wt1和dax1基因广泛分布在包括性腺在内的多个组织中,说明这两个基因的功能比较复杂。而在性腺、脑和眼中能检测到foxl2的表达,表明该基因参与了鱼类眼部结构的形成和发育。amh只局限在性腺中表达,表明该基因对性腺的发育和分化具有重要作用。实时荧光定量和免疫组织化学研究结果发现,wt1基因在三种性别的性腺中都有表达,且wt1蛋白主要在精巢的支持细胞中表达以及只在卵巢的颗粒细胞中表达,表明该基因不管是对精母细胞的生长以及精子的成熟,还是对卵母细胞的生长和成熟都起到了一定的作用;在雌性卵巢颗粒细胞、间质细胞以及未成熟的卵母细胞中能检测到foxl2蛋白的分布,并且在性腺中的表达量雌性>间性>雄性,foxl2蛋白也分布在间性性腺和雄性性腺的精巢间质细胞中,表明卵母细胞的发育以及功能的维持需要foxl2的持续表达,且它对雌雄同体鱼类的精巢功能的维持也起到重要的作用。相反,amh基因在性腺中的表达量雄性>间性>雌性,表明该基因的上调能够启动黄鳝雄性支持细胞的分化,并且对黄鳝雄性的发育和精巢的维持具有一定的作用。dax1不管是在雌性、间性和雄性都有高水平的表达,表明它与黄鳝卵巢的发育以及精巢的发育和维持有关。此外,这些基因也可以通过直接或间接调控cyp19a1a m RNA的表达来调控性腺的发育。本研究测定了HPG轴、HPT轴和HPI轴上相关激素和基因的表达。血清激素测定结果表明,雌二醇(E2)和皮质醇激素在黄鳝性腺发育不同时期没有明显的变化趋势,表明E2和皮质醇对性腺发育的影响可能还受到其受体基因的调控。但三碘甲状腺原氨酸(T3)和游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)在雌性和雄性中表达量很高,但在间性中有显著下降,表明甲状腺激素可能参与黄鳝的性腺发育和性逆转过程的启动。对促性腺激素受体基因的研究显示,fshr和lhr基因在随着黄鳝性腺的发育都有先升高后降低,然后再升高的变化趋势。lhr在产卵前期(雌性V期)表达量达到高峰,而fshr在雄性时期达到高峰,结果表明LH对诱导黄鳝卵母细胞的成熟和排卵有关,且FSH和LH对调节早期精巢的发育,精子的发生以及成熟具有重要作用。star基因的表达模式与fshr类似,表明star基因与黄鳝精巢的早期分化和精子的成熟有关。另外,star基因的表达和fshr基因的表达存在明显的相关性,表明在黄鳝性腺发育过程中,star基因的表达可能受到FSH的调控。在对黄鳝vtg基因的表达模式研究中发现,vtg基因主要在肝脏中表达,特别是在雌性中,说明黄鳝雌性卵母细胞发育过程需要外源性的肝脏合成的卵黄蛋白原。卵巢发育从第III期到第IV期和V期时,vtg基因在肝脏中的表达量显著升高,表明肝脏中卵黄蛋白原基因表达量的升高与卵母细胞卵黄的积累和成熟相关。但随着黄鳝卵母细胞的退化和精巢组织的发育,肝脏中卵黄蛋白原基因表达量显著下降,待进入雄性时期时基本检测不到卵黄蛋白原的表达,表明肝脏卵黄蛋白原合成量的减少有助于卵母细胞的退化和精巢发育的激活。另外,本研究还测定了黄鳝er基因的两个亚型,erα和erβ,以及ar和gr基因在黄鳝性腺不同发育时期肝脏组织和性腺组织中的表达差异。研究表明,erα在肝脏的表达量高于erβ,表明erα比erβ在肝脏卵黄蛋白原的生成调节中具有更重要的作用。erα在肝脏中的表达量随着卵黄的积累以及卵母细胞的成熟逐渐降低,表明E2对雌性黄鳝卵黄的积累的作用可能主要是通过erα来介导的,且随着卵母细胞的成熟,E2诱导卵黄的积累作用减弱。但随着卵母细胞的成熟,vtg的表达量显著性升高,说明卵黄的积累除了受到E2的诱导外还受到其它激素的干扰。在性腺中,erα的表达量随着卵母细胞的成熟逐渐升高,说明性腺卵母细胞的成熟与排卵可能需要一定水平的E2的刺激。当性腺发育进入间性时期,肝脏erα的表达量有所升高,可能是由于黄鳝卵母细胞发育不同步,进入间性时期时仍需要持续的卵黄蛋白原的供应,而性腺中erα的表达量显著降低,表明E2对性腺作用的减退有助于卵母细胞的退化和精巢组织的发育。但雄性性腺中erα也有高水平表达,表明E2也参与了雄性性腺的发育和精巢的维持。ar的表达量在雌性和雄性黄鳝中都是随着卵母细胞和精原细胞的发育与成熟表达量显著升高,表明ar对黄鳝雌性性腺和雄性性腺的发育都起到了一定的作用。gr水平也是随着性腺的发育表达量逐渐升高,特别在雄性性腺中gr的表达量显著升高,表明皮质醇对诱导黄鳝的雄性化具有一定的作用。