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目的：研究联合应用WT1-siRNA和人参皂甙Rg3(genseno sideRg3,Rg3)在逆转体外培养恶性黑素瘤细胞WM451对化疗药物顺铂(DDP)、氮烯咪胺(DTIC)耐药的作用。方法：构建针对WTl基因的siRNA真核表达载体,利用脂质体转染WM451细胞,以G418筛选,获得稳定转染细胞株,分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR).蛋白质印迹法(Western-Blot).免疫细胞化学染色方法检测转染细胞中WT1 mRNA及蛋白表达水平的改变,MTT法检测WT1-siRNA.人参皂甙Rg3对WM451细胞增殖的影响及对细胞耐药的逆转作用,用电镜和tunel法观察WT1-siRNA.人参皂甙Rg3对WM451细胞凋亡的影响。结果：成功构建靶向人WT1基因的siRNA真核表达载体,获得稳定转染细胞株,转染细胞WT1 mRNA及蛋白水平明显下调；WT1-siRNA干扰组细胞的凋亡率(51%)较对照组明显增加(9%),干扰组细胞生长受抑制；人参皂甙Rg3对黑素瘤细胞生长同样有抑制作用且与浓度呈正相关,80ug/ml的人参皂甙Rg3细胞凋亡率(84%)较对照组明显增加(3%)；MTT显示WT1-siRNA分别逆转细胞对顺铂、氮烯咪胺的耐药性2.1、1.5倍,人参皂甙Rg3(5ug/ml)分别逆转细胞对顺铂、氮烯咪胺的耐药性2.34、2.01倍,联合应用WT1-siRNA和人参皂甙Rg3分别逆转细胞对顺铂、氮烯咪胺的耐药性3.81、3.42倍。结论：1.脂质体转染siRNA可特异性下调WT1 mRNA及蛋白水平。2.下调WM451细胞WT1基因表达可促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。3.人参皂甙Rg3可以诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖,其抑制作用与浓度呈正相关。4.单独、联合应用WTl-siRNA和人参皂甙Rg3均可增加顺铂、氮烯咪胺对WM451细胞的抑制作用,逆转WM451细胞对化疗药物的耐药性,且以联合的作用最强,为临床中西医联合治疗提供了实验依据。