目的:α7乙酰胆碱受体（α7-nAChR）是一种配体门控离子通道。α7-nAChR在大脑区域的神经元,小胶质细胞和星形胶质细胞中表达,影响认知和高级皮质功能,参与许多神经精神疾病的发生与发展,包括精神分裂症、自闭症、阿尔兹海默症（AD）、注意力缺陷多动障碍（ADHD）等。因此α7-nAChR是神经精神疾病治疗重要靶点。到目前为止,已有许多α7-nAChR激动剂和正向变构调节剂（PAM）已经成功通过临床前动物试验研究,并且已经进入治疗不同神经精神疾病的临床试验阶段。然而,遗憾的是大多数药物在临床试验中的治疗效果远不如在动物模型中观察到的理想。这种失败的原因之一可能归因于人类进化过程中人类特异性乙酰胆碱受体基因CHRFAM7A的出现。CHRFAM7A基因由FAM7和α7-nAChR（CHRNA7）两个基因部分复制后融合而成。CHRFAM7A基因位于CHRNA7基因的5’端。CHRFAM7A基因转录产生了一个1256核苷酸（bp）的开放阅读框,编码dup-α7-nAChR。其中,来自FAM7的27个氨基酸残基取代了α7-nAChR的N端细胞外配体结合域的146个氨基酸残基,其余蛋白结构域与α7-nAChR完全相同。体外试验证明:dup-α7-nAChR与α7-nAChR形成杂合五聚体,并且显性负性调控α7-nAChR的通道功能。但在体内,CHRFAM7A基因对α7-nAChR的调节作用在很大程度上仍然是一个推测。本研究的目的在于探索大脑中的CHRFAM7A基因对α7-nAChR的调控,从而为治疗与α7-nAChR有关的神经精神疾病提供新的理论依据。方法:CHRFAM7A转基因及对照小鼠的大脑组织经i TRAQ-2D-LC-MS/MS蛋白质组学技术分析差异蛋白质的表达。倍数变化≥1.2或者≤0.83,及p<0.05的蛋白质被认为是有差异表达。结果:CHRFAM7A基因的过度表达显著影响了与α7-nAChR信号通路有关蛋白质的表达,这些蛋白质在神经精神疾病,包括帕金森氏病、阿尔兹海默症、享延顿氏病和酒精中毒等的发生发展中起重要的作用。结论:CHRFAM7A基因及其产物dup-α7-nAChR可能通过微调大脑中的α7-nAChR的功能来影响神经精神疾病的发生与发展。目的:ECRG4是一个肿瘤抑制因子。我们课题组前期研究发现ECRG4在心脏及其传导系统中表达,在心肌缺血保护中起重要作用。但是,负责这种保护的分子机制仍然不确定。为了进一步探究ECRG4在心肌保护作用相关的机制,本实验试图寻找与ECRG4相互作用的蛋白,以探讨其在保护心肌缺血中的作用及其机理。方法:首先用分子克隆技术构建质粒:p LVX-IRES-Zs Green1-2FLAG和p LVX-IRES-Zs Green1-ECRG4-2FLAG;瞬时转染293T细胞,以证实ECRG4是否过表达;用上述质粒包装反转录病毒,感染乳大鼠心肌细胞,确定最合适的MOI值;运用FLAG介导的Pull-down,SDS-PAGE,银染等发现差异蛋白条带,蛋白测序后得到可能与ECRG4相互作用的蛋白;用免疫共沉淀和免疫共定位的方法进一步确证其相互作用;最后找到二者的互作区域并进一步探讨其保护心肌缺氧的分子机理。结果:1.质粒p LVX-IRES-Zs Green1-2FLAG和p LVX-IRES-Zs Green1-ECRG4-2FLAG构建成功,并且可以在293T细胞内过表达。2.p LVX-IRES-Zs Green1-ECRG4-2FLAG病毒转导乳大鼠心肌细胞成功。3.银染后的差异蛋白条带经测序分析表明:Enolase可能与Ecrg4相互作用。结论:Enolase蛋白可能参与Ecrg4对心肌细胞的保护作用。